Avaliação da cinética de gelificação e das propriedades de relaxamento de estresse em hidrogéis de matriz extracelular pulmonar decelularizada utilizando reologia oscilatória

1 Ligue o reômetro Discovery HR-22 para implementar medições de reologia oscilatória. 3 Despeje 250 microlitros de solução de digestão de pré-gel 4 colocada em gelo em uma placa inferior pré-resfriada 5 para evitar gelificação rápida. 6 Abaixe a placa paralela de 20 milímetros 7 até que a solução de pré-gel forme um disco 8 com uma largura de espaço de um milímetro entre as duas placas.

9 Defina a tensão em 0,1% e a frequência em 0,5 hertz. 10 Meça os módulos de armazenamento e perda ao longo do tempo 11 enquanto aquece a placa inferior de 12 a 37 graus Celsius por 30 minutos 13 para observar a cinética de gelificação. 14 Depois que o valor do módulo de armazenamento parar de aumentar 15 e atingir um platô, 16 realizar um teste de recuperação de fluência 17 para avaliar o comportamento de relaxamento de tensão dos hidrogéis.

18 Aplique uma tensão de cisalhamento de Pascal no hidrogel 19 por 15 minutos e meça a deformação. 20 Em seguida, descarregue a amostra da tensão 21 e registre a mudança nos valores de deformação por 15 minutos. 22 Finalmente, desenhe um gráfico de tensão versus tempo 23 para mostrar o comportamento de relaxamento do estresse.

24 O módulo médio de armazenamento 25 e o módulo de perda dos hidrogéis 26 produzidos pelo método de congelamento e descongelamento 27 demonstraram rigidez significativamente maior 28 em comparação com os hidrogéis produzidos 29 usando o método Triton X-100. 30 Os testes de recuperação de fluência revelaram 31 que os hidrogéis obtidos de ambos os métodos 32 exibiram respostas distintas ao estresse 33, indicando diferentes propriedades viscoelásticas.