Para começar, ligue o fotômetro de massa e deixe-o operar por uma hora antes de iniciar qualquer medição. Ligue a energia e acione o botão de isolamento para ativar a mesa antivibração. Em seguida, ligue o compressor de ar para ativar a caixa MicrofluidX.
Em seguida, inicie o software de aquisição de dados seguido pelo software de controle MicrofluidX. Para carregar a amostra e o calbirant, posicione o tubo de centrífuga de calbirant no slot número quatro e o tubo de centrífuga de amostra no slot número cinco dentro da caixa MicrofluidX. Coloque as soluções de limpeza CS1, CS2 e CS3 nas posições um, dois e três, respectivamente, na caixa MicrofluidX.
Encaixe a tampa que conecta a linha tampão à garrafa tampão de 200 mililitros de pH 7.4. Em seguida, coloque o chip MicrofluidX em uma placa de preparação. Conecte a outra extremidade do tubo do sensor da unidade de fluxo S à entrada de amostra do primeiro canal no chip MicrofluidX que completa a linha de amostra.
Insira a outra extremidade do sensor da unidade de fluxo L na entrada do buffer do primeiro canal no chip MicrofluidX, finalizando a linha do buffer. Para coleta de saída, conecte um tubo à saída do primeiro canal no chip MicrofluidX e posicione a outra extremidade em um recipiente de resíduos, frasco ou béquer. Aplique uma pequena quantidade de óleo de imersão do microscópio na lente objetiva do fotômetro de massa.
Posicione o chip MicrofluidX no suporte do fotômetro de massa, garantindo que a entrada da amostra esteja voltada para cima e prenda-a usando o stage clamps. Use o software de aquisição de dados para ajustar a platina, alinhando a área de observação do canal um com a objetiva do fotômetro. Em seguida, feche a tampa do fotômetro de massa e ative o recurso de foco de localização de diluição de gotículas no software de aquisição de dados.
Inspecione o anel de foco branco no canto inferior esquerdo da interface do software. Se houver lacunas indicando bolhas de ar no óleo de imersão, aumente a velocidade do estágio ao máximo e mude suavemente o estágio de um lado para o outro para eliminá-los. Pressione o botão de gravação para iniciar uma medição de um minuto, garantindo que nenhuma impureza esteja presente durante a medição.
Remova a tampa do frasco tampão de 200 mililitros com pH 7.4 e coloque-o no frasco tampão de 200 mililitros com pH 5.0. Coloque o chip MicrofluidX em uma placa de preparação, conforme demonstrado anteriormente, e use o segundo canal no chip MicrofluidX em vez do primeiro para coleta de saída. No software de controle MicrofluidX, mude a chave M para a posição cinco.
Defina a vazão da linha de amostragem para oito microlitros por minuto e certifique-se de que a pressão na linha de amostra permaneça abaixo de 350 milibares. Ao calcular as taxas de fluxo, combine a diferença total na taxa baixa com o fator de diluição da amostra desejado. Após concluir o experimento, siga o protocolo de limpeza para manter a limpeza das linhas.
