Descelularização do baço de ratos para criar uma matriz do baço para engenharia hepática

Para começar, congele e descongele um baço de rato congelado três vezes para lisar as células do baço. Em uma bancada limpa, instale uma bomba peristáltica, um reservatório de dois litros, um tubo de silicone com diâmetro interno de 2,4 milímetros e uma armadilha de bolhas. Encha o sistema de perfusão com água deionizada.

Mantenha-o funcionando por 10 minutos. Transfira cuidadosamente o baço colhido para o recipiente cheio de água deionizada. Em seguida, conecte o tubo de silicone ao cateter venoso que foi inserido na artéria esplênica.

Realize a perfusão com água deionizada, 0,1% SDS, 1% Triton X-100 e soluções PBS. Encha um tubo de centrífuga de 50 mililitros com PBS contendo 10% de estreptomicina de penicilina. Transfira a matriz descelularizada do baço para o PBS.

Armazene-o a menos 20 graus Celsius até novas experimentações. A descelularização completa do baço foi alcançada em aproximadamente 11 horas. A cor gradualmente passou de vermelho escuro para um vermelho claro modelado e, eventualmente, uma aparência translúcida branca, com a morfologia geral permanecendo intacta.