Para começar, dissolva cinco miligramas de doxorrubicina em pó em um mililitro de água destilada. Alíquota do estoque em tubos de 1,5 mililitro. Em seguida, agrupe peixes com uma diferença de peso corporal inferior a 10% juntos.
Depois de anestesiar os peixes na água do embrião com tricaína, retire os peixes da água. Enxugue os dois lados do corpo do peixe com papel de filtro limpo para remover o excesso de água. Em seguida, coloque o peixe anestesiado na ranhura de uma esponja embutida com o abdômen voltado para cima.
Encha uma seringa de 10 microlitros equipada com uma agulha de calibre 34 com cinco microlitros de solução de trabalho de doxorrubicina. Insira a agulha em um ângulo de quase zero grau do ponto médio da nadadeira peitoral em direção ao lado posterior da cavidade cardíaca. Direcione a agulha para a cauda e passe por baixo da pele prateada.
Dispense lentamente a solução dox e, em seguida, retire a agulha ao longo do caminho original para evitar vazamentos. A solução dox colorirá o abdômen de vermelho.