Estabelecimento de culturas de interface ar-líquido (LPA) derivadas do paciente a partir de biópsias de esôfago

Para começar, pegue células isoladas de biópsias de esôfago e ressuspenda-as em quatro mililitros de KSFM com 10 micromolares Y27632. Transferir as células para um balão de cultura de células T25. Uma vez que os queratinócitos formam uma monocamada com 60% a 80% de confluência, passam as células P1.

Em seguida, semeie queratinócitos primários P2 em inserções TRANSWELL para a cultura de interface ar-líquido. Para realizar o transporte aéreo no sétimo dia, substitua o meio na câmara inferior por KSFM com alto teor de cálcio e aspire o meio da câmara superior.