Comece se preparando para a cirurgia. Para realizar a dissecção retroperitoneal, incisar o peritônio à direita da linha média do nível do rim direito até a bifurcação aórtica usando eletrocautério. Exponha nitidamente o rim direito, a veia renal direita, a artéria renal direita e a veia cava inferior, bem como a aorta.
Usando uma alça de vaso grande, obtenha controle circunferencial da aorta infrarrenal distal. Em seguida, obtenha o controle circunferencial da VCI infrarrenal média. E ligue o IVC usando uma gravata de seda 2-0.
Em seguida, obtenha o controle circunferencial das artérias e veias renais direita e esquerda. Ligue essas estruturas usando gravatas de seda 2-0. Prossiga com a dissecção intratorácica retraindo o fígado inferiormente para expor o hemidiafragma direito.
Aplique duas pinças Allis na porção membranosa do hemidiafragma direito e faça uma incisão no diafragma entre as duas pinças usando eletrocautério. Estenda o miotoma do diafragma horizontalmente para aproximadamente sete centímetros. Em seguida, obtenha o controle circunferencial da VCI intratorácica.
Coloque uma gravata de seda 2-0 ao redor da VCI intratorácica e encaixe as extremidades da sutura com um pequeno hemostático sem ocluir a VCI. Em seguida, use dois grampos Allis para retrair a borda da diafragmiotomia inferiormente. E estenda-o para o hemidiafragma esquerdo.
Administrar heparina sistémica ao suíno para anticoagulação por via venosa periférica e aguardar pelo menos três minutos antes de prosseguir. Usando uma agulha de micropuntura de calibre 18, acesse a aorta infrarrenal. Em seguida, passe um fio J pela agulha para a aorta e remova a agulha sobre o fio.
Coloque uma bainha de 10 French sobre o fio na aorta e remova o fio. Em seguida, conecte o tubo IV à bainha francesa 10 e infunda a solução estéril de UW através da bainha a uma taxa de 40 a 60 gotas por minuto de forma estéril. Em seguida, usando uma pinça aórtica, pinçar a aorta infrarrenal e a aorta torácica descendente.
Amarre a VCI intratorácica com a gravata 2-0 colocada anteriormente e administre cloreto de potássio via acesso venoso periférico para eutanásia. Em seguida, isole o ducto pancreático localizando-o na entrada do duodeno. Ligue o duto usando dois laços de seda 3-0 e passe o duto entre os laços.
Complete a pancreatectomia. Para infundir o pâncreas com a solução enzimática, passe bolus de 60 mililitros no ducto pancreático até que toda a solução enzimática seja infundida. Colocado o pâncreas na câmara Ricordi junto com o filtro de malha e a junta de borracha.
E prenda a tampa na câmara Ricordi para selá-la. Em seguida, coloque a serpentina de aquecimento em banho-maria quente ajustado para 47 graus Celsius. Insira as cânulas de entrada e saída no reservatório do circuito de digestão contendo 500 mililitros de 1X HBSS.
Inicie a bomba a uma taxa de fluxo de 450 mililitros por minuto até que toda a câmara esteja cheia com a solução de digestão. Em seguida, diminua a vazão para 100 mililitros por minuto à medida que o fluido circula dentro do circuito.
