Para começar, esfregue o septo de um frasco de hemocultura automatizado, com organismos gram-negativos monomórficos com álcool isopropílico 70% dentro de uma cabine de biossegurança classe 2A. Desenhe cinco mililitros da mistura de caldo de sangue em uma seringa estéril equipada com uma agulha de calibre 21. Em seguida, desinfete o septo de borracha de um tubo separador de borracha.
Transfira a mistura de caldo de sangue para o tubo. Centrifugar a amostra a 160 G durante 10 minutos. Agora, pipete cuidadosamente o sobrenadante dentro de um gabinete de biossegurança.
Transfira o sobrenadante para um novo frasco para injetáveis de colheita de sangue simples. Coloque o frasco tampado em uma centrífuga a 2000 G por 10 minutos. Agora, aspire o sobrenadante com uma pipeta estéril.
Em seguida, dispense três mililitros de solução salina estéril em um tubo aMIAST com um frasco dispensador. Usando uma alça de inoculação estéril, pegue o pellet bacteriano do fundo do frasco e inocule-o no tubo aMIAST. Use solução salina estéril e um densitômetro para ajustar a turbidez da suspensão entre 0,47 e 0,63.
Em seguida, coloque uma fixação capilar do cartão de identificação gram-negativo aMIAST no primeiro tubo. Posicione os cartões selecionados adequadamente no. Agora, carregue o em sua posição na câmara de enchimento com o código de barras da amostra voltado para dentro.
Feche a porta e pressione fill na tela da interface do usuário. Quando o ciclo de enchimento estiver concluído, a luz indicadora azul no sistema piscará. Agora, transfira o da câmara de enchimento para a câmara de carregamento.
Remova os resíduos do quando o carregamento estiver concluído. Subcultive a suspensão restante nos tubos em ágar CLED para verificar a pureza dos isolados. Os resultados de sete frascos de hemocultura positivos, identificados pelo protocolo de inóculo direto, foram discordantes até o nível da espécie.
Dos 105 gram negativos relatáveis por RAST identificados pelo protocolo de inóculo padrão, 98 foram corretamente identificados pelo protocolo de inóculo direto. Entre 99 gram negativos não relatáveis a RAST, um gram negativo relatável a RAST foi identificado em quatro frascos de hemocultura positivos.
