Para começar, ligue o controlador da bomba de microextrusão. Selecione a seringa de volume correspondente e defina a taxa de extrusão em 0,08 mililitros por minuto. Em seguida, divida o volume de hidrogel pela taxa de extrusão e coordene-o com o tempo de impressão desejado para calcular a duração da extrusão.
Em seguida, encaixe a seringa com uma agulha com um diâmetro interno de 210 micrômetros no slot da seringa da bioimpressora. Ajuste o controlador da seringa para garantir que o êmbolo da seringa esteja em contato próximo com o parafuso. Em seguida, coloque três mililitros do banho de suspensão kappa-carragenina preparado em uma placa de cultura de células de 35 milímetros.
Com base nas configurações de código, posicione o prato na plataforma e confirme se o cabeçote de impressão está um milímetro acima do fundo do prato. Depois disso, insira o cartão SD que contém o código na bioimpressora 3D. Ative o arquivo de código, inicie a bioimpressora e clique no botão Iniciar no controlador.
Em seguida, exponha a construção impressa a 405 nanômetros de luz azul por um minuto para iniciar a foto-reticulação. Usando uma pipeta de um mililitro, remova o gel kappa-carragenina, seguido da adição de três mililitros de PBS para lavagem e posterior remoção.