Bioimpressão 3D incorporada de análogos da camada muscular esofágica para engenharia de tecidos

Para começar, pegue as células musculares lisas esofágicas cultivadas assim que atingirem 80% de fluência. Aspire o meio e lave as células musculares lisas endoteliais com cinco mililitros de PBS. Em seguida, adicione dois mililitros de 0,2% de tripsina-EDTA ao frasco e incube por dois minutos para digerir as células.

Adicione dois mililitros de DMEM para encerrar o processo de digestão e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 mililitros. Centrifugue o tubo a 675G por três minutos. Aspire cuidadosamente o sobrenadante e ressuspenda o pellet celular nas biotintas compostas de metacrilato de gelatina e metacriloil de fibroína de seda.

Após a bioimpressão e lavagem da camada muscular esofágica 3D com PBS, aspire cuidadosamente o PBS e substitua-o por três mililitros de DMEM, suplementado com 10% de FBS e 1% de penicilina ou estreptomicina.