Para começar, crie os modelos 3D. Clique em carregar para abrir o projeto do corpo da unidade no software Autodesk Fusion. Na guia Modificar, clique em Alterar parâmetros.
Ajuste as coordenadas para o primeiro local de gravação inserindo a coordenada posterior anterior e o local posterior anterior um e a coordenada medial-lateral no local médio-lateral um e pressione OK. No modelo impresso em 3D, use uma torneira M1 para rosquear os orifícios guia para os parafusos shuttle, que são a extensão dos orifícios do contra-escareamento. Em seguida, deslize uma lançadeira impressa em 3D em um parafuso M1 por 16 e use uma inserção de latão M1 para segurar a lançadeira impressa em 3D no lugar. Usando uma pequena quantidade de pasta de solda, solde a inserção de latão ao parafuso.
Depois que o conjunto da lançadeira for resfriado, gire suavemente a lançadeira impressa em 3D várias vezes ao redor do parafuso. Em seguida, para montar o inversor, corte os tubos de poliimida disponíveis comercialmente com aproximadamente 25 milímetros de comprimento. Insira os tubos-guia de poliimida no corpo da unidade e finalize a inserção usando uma pinça.
Usando uma agulha fina ou palito de dente, aplique uma pequena quantidade de cola líquida de cianoacrilato nos orifícios na parte superior do corpo da unidade para fixar os tubos-guia no lugar. Aplique também cola de cianoacrilato na interface entre os tubos-guia e o estêncil-guia na parte inferior do corpo da unidade. Corte os tubos-guia de poliimida na parte inferior de forma que eles se estendam aproximadamente um milímetro além dos pedestais centrais do corpo da unidade.
Insira dois conjuntos de lançadeira no corpo da unidade. Aparafuse a placa de interface do eletrodo ao corpo do inversor com M-2.5 por cinco parafusos de poliamida. Em seguida, insira uma porca M2 de aço inoxidável na extrusão na metade esquerda da tampa e fixe-a com cola de cianoacrilato.
Bata no orifício na frente da metade direita da tampa com uma torneira M1. Em seguida, prepare duas placas de metal como superfície para criar os feixes de fios do eletrodo. Prenda papel de plotagem na primeira placa e fita adesiva não muito pegajosa na segunda placa com a superfície pegajosa apontando para cima.
Desenhe uma linha clara com um ângulo de 60 graus no papel de plotagem. Para cada feixe de eletrodos, corte o fio do eletrodo no número necessário de peças com o comprimento especificado. Pegue suavemente os quatro fios tocando-os com a ponta do dedo e coloque-os o mais próximo possível um do outro na fita adesiva.
Sob um microscópio, use os dedos ou fórceps para colocar os fios juntos o mais próximo possível. Aplique uma fina camada de cola líquida de cianoacrilato nos primeiros dois centímetros da parte superior do feixe. Depois que a configuração secar completamente, remova o feixe de fios da fita e transfira-o para a placa com o papel de plotagem.
Para os feixes de córtex retroesplenial, faça um corte reto na parte inferior da matriz. Para os feixes de eletrodos do hipocampo, coloque a matriz no papel de plotagem de forma que ela cruze a linha de 60 graus. Em seguida, use a linha como guia para fazer um corte em um ângulo de 60 graus em relação à direção dos fios.
Em seguida, usando uma lâmina de barbear ou bisturi, divida cuidadosamente o mais curto dos quatro fios, cortando perpendicularmente à direção do fio. Para os feixes do córtex pré-frontal, divida a parte inferior da matriz em dois feixes de dois fios. Encurte um dos feixes de dois fios em um milímetro, cortando-o perpendicularmente à direção do fio.
Em seguida, corte dois pedaços de seis centímetros de comprimento para o fio terra. Corte também oito pedaços de seis centímetros de comprimento para o fio do eletroencefalograma. Em seguida, coloque um parafuso M1 por três de aço inoxidável em uma terceira mão.
Enrole o lado desisolado do fio terra ou eletroencefalograma ao redor da haste do parafuso. Aplique uma pequena quantidade de fluxo de solda e solde o fio ao parafuso. Coloque um pino SIP DIP na terceira mão para que o lado fêmea fique acessível.
Insira a parte desisolada do lado oposto do fio no pino SIP DIP e solde o fio ao pino. Em seguida, coloque outro pino SIP DIP no suporte com o lado macho acessível. Solde o lado desisolado do outro fio ao lado macho do pino.
Use um multímetro para verificar se há uma conexão contínua entre o parafuso e a extremidade do fio desisolado do conjunto do pino do fio quando ambos os conjuntos estiverem conectados. Para carregar os feixes de fios na unidade, conecte a unidade a um suporte. Quando o corpo da unidade estiver estável, deslize cuidadosamente um dos feixes de fios no respectivo tubo de poliimida.
Use uma pinça fina para agarrar um dos fios e dobre-o cuidadosamente em direção ao orifício desejado e insira-o. Uma vez inserido, use um alfinete dourado para prendê-lo no orifício de eletrocorticografia. Em seguida, quando as matrizes de fios fixos estiverem alinhadas, aplique uma pequena quantidade de cola epóxi forte na parte superior dos tubos-guia para fixar os feixes no lugar.
Para fixar as matrizes de fios móveis do hipocampo, primeiro mova a lançadeira para a posição mais alta necessária. Em seguida, empurre os feixes de fios na abertura em forma de U da lançadeira e cole-os no lugar com uma pequena quantidade de cola epóxi forte. Insira cuidadosamente a extremidade aberta do conjunto do pino de fio de um fio terra através de um dos orifícios de passagem marcados com o solo e fixe-o usando um pino dourado.
Remova a unidade do suporte. Tome cuidado para não dobrar nenhum conjunto de fios. Para recuperar a placa de interface do eletrodo após a experimentação, empurre suavemente as pinças macias entre a placa e o corpo do inversor ou levante cuidadosamente o EIB com a mão para liberar a ligação de cianoacrilato restante.
A unidade de TD foi implantada em oito ratos para uma corrida piloto, e as cirurgias de implante foram realizadas duas semanas após a chegada. No pós-operatório, os animais apresentaram adaptabilidade aos implantes com eletrodos fixos nas regiões frontal e retroesplenial e feixes hipocampais ajustáveis para aumentar a cobertura do sinal. As gravações do sono foram realizadas em ratos amarrados em uma caixa de gravação, enquanto os dados de vigília foram gravados como gravações sem fio em um labirinto maior.
Em sete dos oito animais, todos os locais-alvo foram alcançados em pelo menos um hemisfério. Enquanto alguns animais começaram a perder seus implantes após dois meses, a maioria os reteve por até 100 dias. Durante este tempo, o potencial de campo local permanece estável, conforme observado pelas oscilações Delta no canal do hipocampo.
