Depois de anestesiar o mouse, coloque-o em decúbito dorsal em uma superfície cirúrgica aquecida. Aplique pomada para os olhos e faça beliscões na almofada do dedo do pé para garantir que o animal esteja adequadamente anestesiado. Levante a pele do abdômen.
Com uma tesoura, faça uma incisão longitudinal na linha média do umbigo ao apêndice xifóide e caudalmente em direção à base do abdômen. Faça uma incisão semelhante no peritônio sem perfurar ou danificar os intestinos, diafragma ou fígado. Em seguida, faça uma incisão transversal de comprimento total em ambos os lados do umbigo para expandir o campo cirúrgico.
Em seguida, use gaze limpa embebida em PBS quente para mover os intestinos grosso e delgado para a direita e expor a VCI abaixo. Com um cotonete, manipule suavemente os segmentos intestinais dentro do campo cirúrgico para localizar a veia porta na raiz do mesentério. Em seguida, use um microscópio de dissecação para passar cuidadosamente uma sutura de prolene 7-0 atrás da veia porta, perto do hilo hepático.
Em seguida, insira uma agulha de calibre 28 de meia polegada de uma seringa de insulina heparinizada de um centímetro cúbico na VCI. Colete 0,2 a 0,3 mililitros da amostra de sangue. Deixe a agulha dentro da VCI para evitar o sangramento que ocorreria com a remoção.
Agora, amarre suavemente a ligadura de prolene 7-0 ao redor da veia porta. Insira a agulha de calibre 28 de meia polegada de outra seringa de insulina heparinizada na veia porta. Aspire para coletar lentamente até 0,5 mililitros de sangue da veia porta.
Quando a coleta de sangue estiver concluída, remova as agulhas da VCI e da veia porta. Transfira as amostras de sangue das seringas para tubos heparinizados de 1,5 mililitro. Coloque os tubos no gelo para processamento futuro.
