Comece o procedimento cirúrgico no camundongo devidamente anestesiado injetando cloridrato de buprenorfina por via subcutânea para reduzir a dor. Aplique pomada oftálmica nos olhos para evitar o ressecamento. Coloque o mouse em uma postura dorsal e prenda os membros em uma posição de alongamento com fitas.
Desinfete a pele posterior usando cotonetes alternados de iodo e álcool, pelo menos três vezes cada. Em seguida, usando uma tesoura cirúrgica, corte uma incisão de 0,5 a um centímetro no lado traseiro esquerdo do animal. Use cuidadosamente uma pinça para separar os tecidos muscular e adiposo até que a parede torácica e o movimento pulmonar sejam visíveis.
Usando uma pipeta, transfira um esteróide multicelular selecionado, ou MCS, de uma microplaca para uma placa de Petri de vidro contendo PBS gelado. Conecte uma agulha de calibre 20 a uma seringa de vidro de 100 microlitros e pré-resfrie-a no gelo. Em seguida, extraia 20 microlitros de uma mistura pré-resfriada de PBS e Matrigel.
Use a seringa para aspirar rapidamente um MCS da placa de Petri em um volume mínimo de mistura PBS-Matrigel, mantendo o esferóide na parte metálica da agulha. Insira suavemente a agulha verticalmente entre duas costelas a uma profundidade de aproximadamente três milímetros e injete lentamente todos os 20 microlitros da mistura contendo o MCS aspirado. Em seguida, remova cuidadosamente a agulha.
Aplique pomada antibiótica tripla na ferida. Sele a incisão com clipes cirúrgicos a serem removidos após duas semanas. Coloque o animal em uma almofada térmica infravermelha e cubra-o com lenços umedecidos de laboratório para manter a temperatura corporal.
Monitore o animal por pelo menos 30 a 60 minutos até que ele acorde e se mova adequadamente. Usando um sistema de imagem de pequenos animais em um canal de 700 nanômetros, meça o sinal fluorescente IRFP do xenoenxerto tumoral do camundongo anestesiado a cada três ou quatro dias. Meça a fluorescência em quatro posturas, esquerda, direita, dorsal e ventral.
A intensidade líquida de fluorescência dos lados esquerdo e ventral mostrou uma tendência semelhante de progressão tumoral, com a fluorescência do lado ventral crescendo ligeiramente mais lentamente do que a fluorescência do lado esquerdo.
