Para começar, pegue os gânglios da raiz dorsal colhidos. Em uma bancada limpa, encha uma placa de Petri de 60 milímetros com meios de corte. Organize o escopo de dissecação e o esterilizador de esferas de vidro e coloque uma caixa de ferramentas de autoclave com ferramentas de corte ao lado do escopo.
Usando o escopo de dissecação, remova qualquer excesso de tecido ao redor do gânglio da raiz dorsal e apare as raízes nervosas próximas ao corpo do gânglio da raiz dorsal. Agora, encha uma segunda placa de Petri de 60 milímetros com mídia fresca. Usando o escopo de dissecação, corte os gânglios da raiz dorsal aparados em aproximadamente 0,5 milímetros.
Transfira os gânglios da raiz dorsal cortados para uma nova placa de 24 poços contendo meio em gelo. Em seguida, pipete 65,1 e 52,8 microlitros do hidrogel pré-misturado nos compartimentos soma e neurite, respectivamente. Incorpore cuidadosamente os gânglios da raiz dorsal cortados no compartimento do soma.
Reticule termicamente o hidrogel na incubadora a 37 graus Celsius por 30 minutos. Em seguida, reticule o hidrogel por UV por 90 segundos. Depois, adicione o meio de crescimento dos gânglios da raiz dorsal ao hidrogel e aos gânglios da raiz dorsal.
Execute uma troca completa de mídia após uma hora para remover qualquer fotoiniciador não reativo ou residual na mídia.
