Para começar, aplique um contorno retangular de esmalte transparente na lâmina de vidro. Prepare várias dessas lâminas de transplante. Para montar o animal anestesiado, use uma pipeta Pasteur e bomba para transferi-lo de RPT para agarose de baixo ponto de fusão ou LMA.
Em seguida, transfira o animal em uma pequena gota de LMA para a lâmina dentro do contorno do esmalte. Antes que a ML se solidifique, use um empurrador de embriões para orientar o animal verticalmente, com o local de inserção da agulha pretendido para a direita. E deixe a agarose endurecer por aproximadamente cinco minutos.
Usando um bisturi, corte uma fatia vertical reta através da gota de agarose à direita do animal montado. Limpe a agarose solta da lâmina. Empregando um bisturi, corte cunhas da agarose para expor o local de inserção da agulha.
Aplique RPT na lâmina até que as gotas de agarose estejam totalmente submersas. E monte a lâmina preparada no microscópio de transplante. Abaixe a objetiva de 40X até que ela quebre a superfície da mídia e levante-a para colocar o animal doador em foco.
Em seguida, coloque em foco as células doadoras de interesse marcadas com fluorescência. Mova o estágio para a esquerda em preparação para localizar a agulha de transplante.
