<p class="jove_title"> Operação dos doadores e Limb Hind-Colheita </p><ol><li> Para o procedimento operatório um conjunto estéril de instrumentos de microcirurgia é utilizado. O cirurgião deve usar vestuário adequado, incluindo luvas estéreis, que devem ser alterados antes do início do procedimento cirúrgico. </li><li> O rato é anestesiados com injeção intraperitoneal de pentobarbital (50mg/kg IP) e colocado em posição supina em um campo de operação aquecida, o que facilita a temperatura do corpo estável animais durante todo o procedimento cirúrgico. </li><li> Antes da incisão na pele do campo da operação é higienizado três vezes com ambos, um desinfetante e álcool. Para evitar que as córneas animais de secagem para fora, os olhos são lubrificados com uma pomada oftálmica (Vidisic) antes da cirurgia. </li><li> A incisão na pele é feita através da virilha direita aproximadamente ao nível do ligamento inguinal. Os vasos femorais são dissecados livre com cautério bipolar e dissecção romba; ramos profundos são ligados com 8-0 seda. </li><li> 300 ul (50 UI) de heparina são injetadas pela veia peniana de anti-coagulação. </li><li> Vasos femorais são ligadas ao nível do ligamento inguinal e cortou distal à ligadura. </li><li> Do membro posterior é lavada com gelado (4 ° C) solução HTK (5ml), através da artéria femoral mais de 5 minutos. </li><li> Todos os grupos musculares estão fortemente divididos com uma tesoura e osteotomia é realizada com uma tomada elétrica rotativa viu no nível do terço distal do fêmur. </li><li> O membro colhida é então imerso em 20 mL de solução gelada HTK para preservação e armazenamento a frio até o transplante. </li></ol><p class="jove_title"> Destinatário Operação e Transplante </p><ol><li> O rato é anestesiados com injeção intraperitoneal de pentobarbital supina e colocado no campo de operação. </li><li> A incisão na pele é feita através da virilha direita aproximadamente ao nível do ligamento inguinal. Os vasos femorais são dissecados livre com cautério bipolar e dissecção romba. </li><li> Vasos femorais estão ligados o mais distal possível, mas proximal para a decolagem navio epigástrica. Pinças vasculares são colocados ao nível do ligamento inguinal na artéria e veia. </li><li> Um cuff de polietileno é puxado sobre a artéria (diâmetro interno cuff: 0,912 mm, espessura da parede cuff: 0,010 mm, comprimento do manguito: 2,0 mm) e veia (diâmetro interno cuff: 1,151 milímetros; manguito parede de espessura: 0,010 mm, comprimento do manguito : 2,0 mm). A borda do lúmen do vaso é então puxado com um vaso dilatador e da artéria femoral e da veia são evertido em todo o corpo do manguito (aproximadamente 2mm) e fixada com uma ligadura de seda circunferencial 8-0. </li><li> Para abrir espaço para o membro doador do membro receptor é removido com dissecção aguda de grupos musculares e osteotomia é realizada em meados da década de fêmur. </li><li> O membro doador é retirado da solução HTK e transplante começa com osteossíntese do fêmur usando uma agulha de calibre 18 (comprimento: 1.5-2.0 cm) como uma haste intramedular. </li><li> Grupos musculares ventrais estão intimamente aproximada com Vicryl 4-0 Prolene ou suturas interrompidas. </li><li> Anastomoses vasculares são realizadas por puxar a veia e artéria doadora sobre a veia destinatários e complexo manguito. A ligadura de seda 8-0 circunferencial é novamente colocada para proteger a anastomose. </li><li> O grampo venoso é liberado seguido pelo clamp arterial, e reperfusão é visualizado pelo retorno da cor ao membro distal e pé, bem como o fluxo pulsátil através da artéria. </li><li> Os restantes grupos musculares dorsais são re-aproximação com Vicryl 4-0 Prolene ou suturas interrompidas. </li><li> A pele é fechada com vicryl 4-0 ou prolene suturas interrompidas. </li><li> O rato destinatário é colocado sobre uma almofada de aquecimento e acompanhada de perto até a recuperação. </li><li> Animais destinatário receber antibiótico profilático (cefazolina, 20 mg / dia, IM) e Buprenex (0,1 mg / kg, SC) por três dias após o transplante. </li></ol>

<ol>
	<li>Shapiro, R. I., Cerra, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+for+reimplantation+and+transplantation+of+a+complex+organ:+the+rat+hind+limb.">A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb.</a> <em style='font-style: italic'>J Surg Res</em>. <b>24</b> (6), 501-506 (1978).</li><li>Petruzzo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+registry+on+hand+and+composite+tissue+transplantation.">The international registry on hand and composite tissue transplantation.</a> <em style='font-style: italic'>Transplantation</em>. <b>86</b> (4), 487-492 (2008).</li><li>Schneeberger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+forearm+transplantation:+outcome+at+3+years.">First forearm transplantation: outcome at 3 years.</a> <em style='font-style: italic'>Am J Transplant</em>. <b>7</b> (7), 1753-1762 (2007).</li></ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

<p class="jove_content"> Décadas de pesquisa experimental e permitiu que o precederam transplante de mão bem-sucedido humanos no passado recente. Em 1978, Shapiro et al. desenvolveu um modelo de transplante ortotópico traseiras membro em ratos, bem adequado para estudar vários aspectos patológicos, fisiológicos e imunológicos, bem como o resultado funcional dos enxertos de tecido composto. Nós modificamos a parte mais desafiadora do processo, ou seja, a anastomose vascular, através da introdução de uma técnica não-cuff sutura. Quan...

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		<div>
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		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Nembutal&reg;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ovation Pharmaceuticals, Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Heparin Immuno</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ebewe Pharma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Custodiol HTK Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Essential Pharmaceuticals</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Adventitia Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ASSI</td>
<td>ASSI&reg;SAS-21 R-8T</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ASSI</td>
<td>ASSI&reg;JFC-7</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dilator Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ASSI</td>
<td>ASSI&reg;D-5AZ</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Polymide Tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>River Tech Medical</td>
<td>#17; #19</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

orthotopic hind-limb transplantation in rats

<p class="jove_content"> Alógenos de tecido composto (CTA) agora representa uma opção terapêutica válida após a perda de uma mão, antebraço ou dígitos e tornou-se uma nova entidade terapêutica em cirurgia reconstrutiva. No entanto, a longo prazo de altas doses de terapia multi-droga imunossupressora é necessária para garantir a sobrevida do enxerto, com o risco de efeitos secundários graves que cabrestos mais ampla aplicação. Progressão neste campo pode depender de uma melhor compreensão da imunologia básica e isquemia e reperfusão em enxertos de tecido composto. </p><p class="jove_content"> Até o momento, o transplante ortotópico membro pélvico em ratos tem sido o modelo preferido para roedores reconstrutiva transplante (RT), no entanto, é um procedimento extremamente exigente, que requer técnicas de microcirurgia extraordinária para o reatamento da vasculatura, ossos, músculos e nervos. </p><p class="jove_content"> Nós introduzimos a técnica de anastomose vascular manguito a este modelo, oferecendo uma abordagem rápida e confiável para o transplante dos membros posteriores de ratos. Esta técnica simplifica e encurta o procedimento cirúrgico e permite que os cirurgiões com experiência microcirúrgica básico para conseguir realizar a operação com a sobrevivência alta e baixas taxas de complicação. A técnica parece ser adequada para imunológica, assim como lesão de reperfusão de isquemia (IRI) estudos. </p>

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Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

<p class="jove_content">Aqui nós descrevemos o rato ortotópico membro-hind procedimento de transplante, o que parece ser o padrão ouro<em&gt; In vivo</em&gt; Modelo para a pesquisa composta de tecido alotransplante.</p>

Transplante Limb-Hind ortotópico em ratos

Composite tissue allotransplantation (CTA) now represents a valid therapeutic option after the loss of a hand, forearm or digits and has become a novel ...

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

11.6K visualizações.  Innsbruck Medical University. Aqui nós descrevemos o rato ortotópico membro-hind procedimento de transplante, o que parece ser o padrão ouro In vivo Modelo para a pesquisa composta de tecido alotransplante.