Para começar, faça um fone de ouvido de eletrocorticografia ou ECoG soldando um fio de aço inoxidável revestido com perfluoroalcoxi a um conector de três pinos. Depois de identificar as coordenadas de inserção com base em um atlas estereotáxico do mouse, posicione o mouse anestesiado no quadro estereotáxico. Coloque o nariz do animal no cone do nariz e estabilize a cabeça com barras de cabeça.
Em seguida, faça um teste de pinça do dedo do pé para verificar a profundidade da anestesia. Depois de fazer uma incisão no couro cabeludo de cinco milímetros acima dos ossos parietal e occipital, raspe as meninges com a lâmina do bisturi para removê-las. Use a lâmina do bisturi para cortar as inserções musculares e expor os ossos parietal e occipital.
Aplique peróxido de hidrogênio para controlar o sangramento e secar a superfície do crânio. Em seguida, identifique os pontos de referência bregma e lambda no crânio. Em seguida, ajuste a posição do cone do nariz para nivelar a posição ântero-posterior do crânio.
Para nivelar a posição lateral medial do crânio, escolha dois pontos opostos entre bregma e lambda e verifique seu nível. Agora, meça a distância entre bregma e lambda e compare-a com a distância relatada no Atlas Estereotáxico Franklin Paxinos. Use a diferença entre as distâncias medidas e relatadas para dimensionar a coordenada ântero-posterior proporcionalmente.
Marque as coordenadas da craniotomia no crânio com um lápis esterilizado. Usando um micromanipulador estereotáxico, posicione a placa de cabeça diretamente no topo da sutura lambda. Aplique cimento dental na placa da cabeça e ao redor dela para prendê-la ao crânio e deixe secar por 10 minutos.
Em seguida, faça furos para dois eletrodos corticais e um eletrodo de referência. Coloque as extremidades descascadas dos eletrodos de fio de prata revestidos dentro dos orifícios das rebarbas e prenda-os usando resina ativada por luz ultravioleta. Cubra completamente os fios de aço inoxidável revestidos com cimento dentário para que nenhum fio fique exposto.
Cubra a parte inferior e as laterais do fone de ouvido com cimento dental para garantir que esteja firmemente no lugar e permitir que o mouse se recupere por sete dias.
