Para começar, dissolva 10 gramas de pó de DMEM e 5,95 gramas de HEPES em um litro de água destilada e ajuste o pH do meio para 6,91. Aliquotar a solução em recipientes menores e armazená-los a quatro graus Celsius. Em seguida, misture o meio 88% DMEM com HEPES, soro bovino fetal 10% e estreptomicina 2% de penicilina.
Para preparar o peixe-zebra, monte um recipiente ou um tanque com aproximadamente dois litros de água para quatro a cinco peixes-zebra adultos. Usando uma rede de pesca, transfira de quatro a cinco peixes-zebra adultos para o tanque preparado. Prepare recipientes separados com água para anestesiar e recuperar o peixe-zebra.
Depois de anestesiar um peixe-zebra adulto, use uma colher de plástico para transferir o peixe para uma placa de Petri forrada com uma toalha de papel úmida e coloque a placa sob um estereomicroscópio de dissecação. Em seguida, usando uma pinça fina, puxe suavemente a direção anterior para a posterior para remover as escamas. Coloque cada incrustação individual em um tubo separado de 0,2 mililitro contendo a solução de trabalho do meio de cultura da incrustação e coloque os tubos dentro de uma incubadora ajustada para 28 graus Celsius.
Após a remoção da escama, devolva cuidadosamente o peixe-zebra ao tanque de recuperação e monitore-o. Assim que o peixe-zebra retomar o movimento, devolva-o ao tanque de criação regular.
