O trabalho de pesquisa atual é doxycycline carregado de cetamimes compostos de colágeno-chitosano para a cura acelerada de feridas diabéticas. Diabetes é uma doença metabólica crônica caracterizada por níveis elevados de glicose no sangue. Quanto maior o tempo que o indivíduo tem diabetes, maior o risco de complicações, como doenças cardiovasculares, nefropatia, neuropatia, retinopatia e dano no pé, etc.
Danos nos nervos nos pés e também fluxo sanguíneo ruim para os pés aumentam o risco de várias complicações do pé. Se não tratadas, essas feridas podem, em última análise, exigir amputações nos dedos, pés ou pernas. Aproximadamente, 25% dos pacientes com diabetes mellitus têm a oportunidade de construir uma ferida diabética durante a vida.
O manejo terapêutico das feridas diabéticas continua sendo um obstáculo até o momento que precisa ser eventualmente cruzado. Embora a fisiopatologia da ferida diabética seja multifatorial, acredita-se que o tratamento local com anti-inflamatórios poderia diminuir os níveis elevados de MMP-9 e restabelecer o arranjo da estrutura cutânea da homeostase e provocar a cicatrização em feridas diabéticas. Doxycycline, o inibidor MMP-9, foi escolhido neste estudo para suprimir esses níveis elevados de MMP-9, uma das principais moléculas inflamatórias responsáveis pela inflamação contínua das feridas diabéticas.
Por outro lado, os biomateriais fascinam os seres humanos por várias décadas e têm sido o cerne de muitos avanços médicos que mudam o jogo para a entrega eficiente de drogas e macromoleculares e o desenvolvimento de dispositivos biomédicos sob medida. Assim, com esta breve introdução, preparamos um andaime de colágeno-chitosano carregado de doxiciclina para atenuar, para acelerar a cicatrização retardada em feridas diabéticas. Este é Bharat Kumar Reddy, pesquisador do Departamento de Farmacologia, JSS College of Pharmacy, Ooty, Índia.
Hoje estamos aqui para olhar o procedimento, como preparar o andaime de colágeno carregado de doxiciclina para a cura acelerada de feridas diabéticas. Vamos ter um vislumbre do procedimento, como se preparar. Vamos preparar 1,2% da solução de colágeno, para a qual estamos tomando 1,2 gramas de colágeno Tipo-I, que é de origem rabo de rato.
Para isso, estamos adicionando 100 ml de água millipore e manteve-a de lado por meia hora, a fim de permitir que o colágeno fique protuberância na água. Na etapa seguinte, foi preparada 0,8% da solução quitosana, para a qual estamos tomando 0,8 gramas de quitosan de peso molecular médio, e isso foi misturado com 100 ml de ácido acético de 1%. Esta solução também, nós mantivemos de lado por meia hora.
Após meia hora, ambas as soluções foram submetidas a agitação mecânica durante a noite em um RPM de 2000. Para a solução de colágeno agitado durante a noite estamos lentamente adicionando um grama de doxiciclina. E a solução contendo este colágeno e doxiciclina foi submetida por meia hora de agitação em um RPM de 2000.
Para esta solução estamos lentamente adicionando solução chitosana agitada durante a noite. E isso, certifique-se de que é rotulado como mistura física que contém doxiciclina, colágeno, chitosan. Esta mistura física que submetemos por mais meia hora de agitação em um RPM de 2000.
Após meia hora, essa mistura física foi transferida para os respectivos moldes de alumínio, que tem uma dimensão de dois a dois centímetros e uma espessura de 0,5 centímetro. Mais tarde, esses moldes foram transferidos para um recipiente de metal. Estes recipientes metálicos continham os moldes de alumínio, foi submetido a congelamento profundo.
Depois de 24 horas, podemos ver claramente a mistura física solidificada contendo doxilalina, colágeno e chitosan. Essa mistura física solidificada foi ainda mais submetida à liofilização. A liofilização foi realizada a menos 85 graus mais ou menos quatro graus Celsius durante 72 horas.
Após 72 horas, o material liofilizado foi retirado do liofilizado. E aqui podemos ver claramente a mistura física completamente seca, que não é nada além de conhecida como doxycycline carregado de colágeno-chitosan andaime. Estes andaimes foram submetidos a crosslinking A fim de realizar crosslinking, inicialmente, o buffer MES foi preparado tomando 0,488 gramas de MES e 15 ml de água, dos quais estamos tirando 20 ml de buffer MES e transferindo separadamente para o seu béquer.
Para estes 20 ml de béquer, 50 mg de doxycycline carregado colágeno-chitosan foi adicionado. E a imersão deste andaime foi realizada por meia hora. Depois de meia hora, o andaime de colágeno-chitosano carregado de doxycycline foi retirado do buffer MES de 20 ml.
Além disso, foi embebido em uma solução contendo 19,5 ml de tampão MES, 0,1264 gramas de EDC e 0,014 gramas de NHS. A imersão foi realizada durante quatro horas de intervalo de tempo para a conclusão do crosslinking. Após o crosslinking, o andaime de doxiciclina carregado de doxiciclina foi retirado da solução e transferido para um recipiente, que foi detalhado no procedimento anteriormente, e secou separadamente.
Aqui podemos ver claramente o andaime não-cruzado e transligado, juntamente com as mesmas imagens. A partir das imagens é claro que a interligação do andaime resultou na diminuição do tamanho dos poros devido à formação de fortes ligações intramoleculares. O rato Wistar macho foi levado e os dois em marca de dois centímetros foram desenhados na região torácica dorsal.
A ferida de excisão foi criada em torno da marca e o rastreamento da ferida foi levado em uma folha de OHP. O traço da ferida foi medido com a ajuda do método gráfico. A ferida criada no animal foi de cerca de 176 mm.
Mais tarde, a ferida criada foi tratada com doxycycline crosslinked carregado de ceta de colágeno-chitosan com o curativo primário e monitorado por 21 dias. Uma vez que o animal foi recuperado da anestesia, cada animal foi enjaulado individualmente. E esses animais foram alimentados com dieta normal e água.
Todos os animais, após a criação da ferida, foram divididos em três grupos em que cada grupo continha seis animais. Aqui podemos ver claramente a diferença entre zero dia e sete dias em que a doxiciclina carregada de escaminho cruzado foi de cerca de 48% E nesta imagem podemos ver claramente a diferença entre o dia 14 e o dia 21 de todos os grupos em que o andaime de colágeno carregado de doxiciclina foi curado em torno de 99% A área curada foi isolada e processada para estudos histopatológicos com a ajuda da coloração do HMB. Aqui podemos ver claramente a epiderme reepithelizada, no dia 21, no andaime de colágeno carregado de doxiciclina.
Considerando que no controle e no andaime cruzado, nada além de placebo, ainda assim a epiderme tinha que ser formada. Como nosso próprio estudo, os andaimes cruzados doxiciclina preparados têm exibido muitas propriedades ideais, como boa resistência mecânica, biocompatibilidade, absorção sustentada de água de liberação, juntamente com propriedades antibacterianas e anti-inflamatórias. Estes andaimes podem ser uma forma ideal de dosis para o tratamento de feridas diabéticas.
