Хоботок Расширение отклика (PER) Пробирной у дрозофилы

Резюме

Хоботок ответ продление или PER является анализ вкус поведения, которые были использованы в мух, а также в пчел. Когда хоботок вступает в контакт с привлекательной вещество, летают расширяет свою хоботок потреблять вещества. Решения различных сахаров очень привлекательны для летать.

Аннотация

Хоботок расширение ответа (PER) является анализ вкус поведения, которые были использованы в мух, а также в пчел.

На поверхности рта мухи (labellum), Есть похожие на волосы структуры, называемые сенсиллы в котором находится вкус нейронов. Когда привлекательным вещество вступает в контакт с labellum, летать расширяет свою хоботок потреблять материала. Хоботок Расширение отклика (PER) анализ мер этот ответ вкус поведения, и это полезный метод, чтобы узнать о пищевых предпочтениях в одной летать. Решения различных сахаров, таких как сахароза, глюкоза и фруктоза, очень привлекательны для летать. Влияние веществ отвращение можно также проверить, как снижение PER при смешивании в сладкий раствор.

Несмотря на простоту основной процедуры, Есть много вещей, которые могут помешать ему работать. Одним из факторов, который требует внимания управляемое состояние мухи. Требуемое время голода принести лететь в надлежащее управляемое состояние существенно меняется от 36 до 72 часов. Мы создали серию контроля для оценки состояния мухи и скрининга, который позволяет из не отвечающих или гипер проблематику отдельных животных. Другим важным фактором является уровень влияния и положения контакта с labellum, который будет трудно описать словами. Это видео презентация демонстрирует все это вместе с рядом других усовершенствований, которые повысили бы воспроизводимость этого метода.

протокол

Голодание

1. Во-первых, голодать летать.
2. Положите небольшой кусочек Ким-протрите пропитанной водой в пустой флакон.
3. Передача 20-30 сытых летит в пустой флакон.
4. Проверка каждые 12 -24 часов, чтобы убедиться, бумага влажная.
5. Голодать лететь 36-72 часов.

Fix летать

1. Возьмите одну летать в аспиратор.
2. Место 200 мкл желтый опрокинуться открытия. Одновременно листать и дует на нее, вы можете сжать взлететь в желтый наконечник.
3. Осторожно применять некоторые воздуха подтолкнуть летать до точки, где она не может двигаться.
4. С помощью бритвы, необходимо поставить галочку примерно в глаза, а мухи, то сосать лететь обратно и отрезал кончик.
5. Аккуратно удар лететь обратно в положение, но только до достижения самого конца, сделать уклон сократить на позиции, где хоботком будет расположен. Вы можете обойтись без этой наклонной порез, но это, несомненно, делает следующий процесс проще.

Подготовка сахарозы фитилей

1. Твист 6 мм шириной полосы Kimwipes ® бумаги в потоке, и растащить на мелкие куски в шишках формы фитиль (<1 см).
2. Эти маленькие фитили, погрузились в сахарозу растворов или воды и представлены хоботок, делая контакт.

Подготовка управления и экспериментальных животных

1. Перед тестированием любая tastants, дают 4% раствором сахарозы в лету. Это действует как положительный контроль. Не использовать летать, что не ответил.
2. Затем тест дН ₂ 0 на лету. Этот акт в качестве отрицательного контроля. Отменить лету, если он отвечает.
3. Испытание этих элементов управления после тестирования вашей tastants.

Обсуждение

В этой презентации, мы прошли через все шаги для хоботок анализа ответа расширение. Метод кажется довольно простым, но как и во многих других анализов поведения, многие малые вещи могут предотвратить анализа от работы. Мы прошли через много таких шагов, которые требуют тщательного внимания. Здесь ?...

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
HDR-HC1	Camera	Sony Corporation
SMZ800	Microscope	Nikon Instruments
P-IBSS	Camera Adapter	Nikon Instruments
1x DC10LN	Camera Adapter	Optem, Qioptiq Inc.
257010	Camera Adapter	Optem, Qioptiq Inc.
TREKKER Mk2	Tripod	BENBO
Gorillapod SLR	Tripod	Joby
iMac G5	Computer	Apple
Power Mac G5	Computer	Apple
iMovie	Software	Apple
MPEG Streamclip	Software	SQUARED 5