JoVE Logo

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • протокол
  • Обсуждение
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Новое в системе пробирке для одновременной загрузки четыре сухожилия в культуре описывается.

Аннотация

Травмы сухожилий (например, запястья тендинит, epicondyltis) из-за чрезмерного распространены в спортивных мероприятиях и на рабочем месте. Большинство из них связаны с повторяющимися, высокой активности стороны силы. Механизмов клеточного и структурные повреждения из-за циклического нагружения не известно. Целью этого видео является презентация новой системы, которые могут одновременно загружать четыре сухожилия в культуре ткани. Видео описываются методы сбора стерильной ткани и как сухожилия загружены на зажимные системы, которая впоследствии погружается в средствах массовой информации и поддерживается на уровне 37 ° C. Один зажим фиксируется, а другой перемещается с линейным приводом. Сухожилия силы растяжения контролируется с датчика последовательно с мобильного зажимом. Приводы контролируются с помощью программы LabView. Четыре сухожилия может быть повторно загружены с различными формами загрузки, частота повторения, скорость загрузки, и продолжительность. Загрузка может продолжаться в течение нескольких минут до 48 часов. В конце погрузки, сухожилий удаляются и середине вещества, экстрагированного для биохимических анализов. Эта система позволяет при исследовании эффектов загрузки узоры на экспрессию генов и структурные изменения в сухожилии. В конечном счете, механизмы повреждения из-за чрезмерного могут быть исследования с выводами применяется для лечения и профилактики.

протокол

  1. Дополнение СМИ СО 2-независимые средства массовой информации с эмбриональной телячьей сыворотки, L-глутамина, антибиотиков, и аскорбиновой кислоты
  2. Алиготе 40 мл в 50 мл пробирки центрифуги (1 для каждого сухожилия)
  3. Алиготе 10 мл на 15 мл пробирок центрифуг (1 для каждого сухожилия)
  4. Стерилизовать хирургические инструменты, автоклав листов, пинцет и гаечный ключ в автоклаве
  5. Стерилизовать зажимы и советы силу микрометра путем замачивания в 70% этанола ночь
  6. Урожай сухожилия из задней лапы кролика. Кролик должны были быть умерщвлены не более 2 часов назад.
  7. Место сухожилия в 15 мл центрифужную пробирку заполнены СМИ
  8. Выложить стерилизовать автоклаве листа создать стерильные поле
  9. Мера площади поперечного сечения сухожилия
    1. Место микрометра советы по микрометра, выровнять правильно
    2. Ручки сухожилия к концам
    3. Fit тонкий разделе сухожилия в паз
    4. У помощника место 50g вес
    5. Подождите 30 секунд, читать толщины (CSA = толщина х 1,3)
  10. Место сухожилие еще в 15 мл центрифужную пробирку
  11. Повторите с каждой сухожилие должно быть загружено
  12. Удалить привод из базы
  13. Вырежьте два 15 мм на 40 мм полоски и одна 3 мм на 5 мм кусок из стерильных марлевых для каждого сухожилия
  14. Раскатайте каждый полосы плотно и между канавками дистального зажим
  15. Удалить сухожилия от центрифуги трубы и место на зажим, дистального конца сухожилия на дистальной зажим и волокнистый хрящ области сухожилия на проксимальных зажим
  16. Место 3x5 кусок марли поверх дистального конца сухожилия и безопасный зажим
  17. Безопасные проксимальных зажим, обеспечение сухожилие остается соответствие между зажимами и с достаточно слабый, что он не находится под напряжением, когда зажимы затянуты. Затяните зажимы для 1N-м
  18. Место 50 мл центрифужную пробирку со средствами массовой информации в базе
  19. Установить привод в базовой
  20. Повторите с каждой сухожилие должно быть загружено
  21. Место базы за водяной бане
  22. Загрузка протокола
    1. Условие сухожилий
    2. Применяют 0,5 N нагрузку, измерять длину сухожилий (это расстояние между метками)
    3. Применение циклического нагружения
  23. Удалить привод из базы
  24. Выпуск сухожилия от зажимов
  25. Процесс сухожилия

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Обсуждение

Видео представляет новую систему для одновременной загрузки до четырех жить сухожилия в культуре ткани. Типичная длительность загрузки от 2 до 48 часов. После загрузки, сухожилий удаляются и обрабатываются для экспрессии генов. Система позволяет для исследования влияния загрузки рисунка на измен...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Материалы

Пользовательские 4 линейных приводов загрузки системы Теплый водяной бане 50 мл пробирки сухожилий (кролик) Стерильные СМИ

Ссылки

  1. Asundi, K., Kursa, K., Lotz, J. C., Rempel, D. In vitro system for applying cyclic loads to connective tissues under displacement or force control. Ann Biomed Eng. 35, 1188-1195 (2007).
  2. Asundi, K. R., Rempel, D. M. Cyclic loading inhibits expression of MMP-3 but not MMP-1 in an in vitro rabbit flexor tendon model. Clin Biomech. , In Press Forthcoming.
  3. Asundi, K. R., Rempel, D. M. MMP-1, IL-1β and COX-2 mRNA Expression is Modulated by Static Load in Rabbit Flexor Tendon. Ann Biomed Eng. , In Press Forthcoming.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

4

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены