Малый трансплантации кишечника у мышей

Резюме

Мышь маленькая модель трансплантации кишечника был признан в качестве важного инструмента для изучения mechanismes от иммунного отторжения и экран новых иммуносупрессивных препаратов. Однако эта модель ограничена в использовании, поскольку методы участие является чрезвычайно технически задача. Теперь введем изменение техники.

Аннотация

С 1990 года развитие такролимуса основе иммунитета и улучшение хирургической техники, увеличился массив мощных иммуносупрессивных препаратов, профилактика инфекций, и подходящий выбор пациента помогли улучшить актуарных трансплантата и выживаемость пациентов ставки по всем видам кишечника трансплантации. У пациентов с необратимыми кишечной недостаточности и осложнений парентерального питания теперь должны регулярно рассматриваться для малых трансплантации кишечника. Тем не менее, показатели выживаемости при трансплантации тонкого кишечника не спешат улучшать сравнивает все более выгодно почек, печени, сердца и легких. Небольшой трансплантации кишечника-прежнему остается неудовлетворительным по сравнению с другими органами. Дальнейший прогресс зависит от более глубокого понимания иммунологии и физиологии трансплантата и могут в значительной мере способствовало животных моделях. Более широкое использование мыши маленькая модель трансплантации кишечника необходимо в исследовании иммунологии и физиологии трансплантации кишечника, а также эффективных методов в диагностике ранних отказа. Однако эта модель ограничена в использовании, поскольку методы участие является чрезвычайно технически сложной задачей. Мы разработали модифицированную технику. При принятии анастомоз воротной вены и нижней полой вены, два швов пребывания принимаются на вершине проксимальных и дистальных вершине нижней полой вены с получателем с портальной вены донора с. Левой стене нижней полой вены и воротной вены донора с закрыта с продолжением швы с внутренней стороны нижней полой вены после того, после одного узла с проксимальных пребывания вершине шва правой стенки нижней полой вены и портальной доноров с вены закрываются продолжает швов снаружи пещеры уступает поле с 10-0 швов. Этот метод проще, поскольку для выполнения анастомоза производится только на одной стороне нижней полой вены и 10-0 швов нужного размера, чтобы избежать кровотечения и тромбоз. В этой статье мы представить подробную информацию о технике в дополнение к видео.

протокол

Подготовка доноров и малых урожая кишечника:

1. Мышь ansetheized с внутрибрюшинного введения фенобарбитала и помещены на спине на операции на местах.
2. Долго средней линии брюшной надрез. Проксимальной тощей кишки, была идентифицирована и лигировали с 6-0 швов. Прикрепленный мезентериальных сосудов дистальнее тощей кишки галстук лигировали с 8-0 швов.
3. Дистальной подвздошной кишки, была идентифицирована и лигировали с 6-0 швов. Прилагается суда брыжеечной дистальнее подвздошной кишки лигируют с 8-0 швов.
4. Портал подвергается от окружающих жира и придает тканям, лигируют и разделен панкреатодуоденальной и селезеночной вен.
5. Брюшной аорты и подвергается воздействию верхней брыжеечной артерии от окружающих тканей.
6. 1 мл гепарина (10u/ml) вводится в нижней полой вены для гепаринизация.
7. Воротной вены разделен на воротах печени и верхней брыжеечной артерии отделяется от аорты, в том числе Каррель участок аорты.
8. Тощей кишки и подвздошной кишки делятся дистальнее связей. Тонкого кишечника удаляется, затем хранится при температуре 4 ° С в солевом растворе.

Получатель подготовки и трансплантации:

1. Мышь ansetheized с внутрибрюшинного введения фенобарбитала и помещены на спине на операции на местах.
2. Долго средней линии брюшной надрез. Брюшной содержимое убираются вне брюшной марлей, чтобы разоблачить брюшной аорты и нижней полой вены.
3. Ветвей брюшной аорты и нижней полой вены подвергаются и лигировали с 10-0 швов.
4. Проксимальной и дистальной лигатуры помещена вокруг аорты и нижней полой вены, соответственно.
5. Венотомия выполнен в нижней полой вены реципиента с 30 иглы. Открытие затем распространяется на длину равную воротной вены донора с микро-ножниц.
6. Aortotomy выполнен в брюшной аорты получателя, 30 иглы. Открытие затем распространяется на длину равную верхней брыжеечной артерии донора Каррель патч с микро-ножницы
7. Разрезов брюшной аорты и нижней полой вены являются перфузии физиологическим раствором.
8. Тонкого кишечника донора помещается на левой стороне живота получателя покрытие с марлей.
9. Пребывание швы располагаются на вершине проксимальных и дистальных вершине получателя брюшной аорты с верхней брыжеечной донора патч Каррель артерии.
10. Анастомоз в правой части брюшной аорты реципиента и верхней брыжеечной артерии донора Каррель патч завершен первый с продолжением швов.
11. Два швов пребывания производится сначала в проксимальных и дистальных вершине вершине нижней полой вены получателя с порталом донора для анастомоз воротной вены донора и нижней полой вены получателя.
12. Левой стене нижней полой вены и воротной вены донора закрыта с продолжением швов во внутренней нижней полой вены.
13. После одного узла с проксимальных шва пребывания вершине, правой стенки нижней полой вены и воротной вены донора закрыта с продолжением швов снаружи нижней полой пещере.
14. Тонкого кишечника донора не переходит к правой стороне живота получателя. Правой стенки брюшной аорты реципиента и верхней брыжеечной артерии донора анастомоза замкнутый продолжать швов.
15. В конце концов анастомоза сделан, дистальной лигатуры удаляется сначала проверить, кровотечение из анастомоза.
16. Если есть мало или нет кровотечение из анастомоза проксимальных лигатуры удаляется. Тонкого кишечника донора заполняется кровью немедленно; цвет тонкой кишки становится красным.
17. Дистального конца трансплантата подвздошной кишки является anastomosed конца в сторону проксимального отдела тощей кишки получателя с непрерывным швом из 8-0 швов.
18. Проксимальной тощей кишки от донора экстериоризируется как стомы и закреплены кожи на правой стороне брюшной стенки с четырьмя швами каждой стороны 8-0 швов.
19. Кишечник возвращаются в брюшную полость и закрылся с 6-0 швов продолжаться.
20. Получатель мыши помещается на теплое место. Через час, получатель восстанавливает.

Обсуждение

Уникальный иммунный ответ после небольшого трансплантации кишечника была предметом обширных исследований с использованием маленькая модель трансплантации кишечника у мышей. Основные иммунологические реакции, такие как трансплантат против реакции, хозяин-против-трансплантат реакция, сочетан?...

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Sutures	10-0 and 11-0	MONOSOF
Microscope	Unversal S3	Carl Zeiss, Inc.