JoVE Logo

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Хирургическая процедура используется, чтобы вызвать экспериментального инфаркта миокарда у мышей начинается с левой торакотомии между третьим и четвертым ребрами для визуализации передней поверхности сердца и левого легкого. Левой коронарной артерии лигируют, грудь закрыта, а мышь имеет право восстановить спонтанно.

Аннотация

Инфаркт миокарда (ИМ) является одной из наиболее важных причин смертности в организме человека 1-3. В целях повышения заболеваемости и смертности у пациентов с ИМ нам нужны лучшие знания о патофизиологии ишемии миокарда. Это знание может быть полезным для определения новых терапевтических мишеней для лечения сердечно-сосудистых инновационных 4. Экспериментальная модель MI у мышей становится все более популярным малого модели животных в доклинических исследованиях, в которых MI индуцируется с помощью постоянной или временной перевязкой левой коронарной артерии (ЛКА) 5. В этом видео мы опишем шаг за шагом метод, как вызвать экспериментальный MI у мышей.

Животное первый наркоз с 2% изофлурана. Бессознательном мыши, затем интубированных и подключен к аппарату искусственной вентиляции легких для искусственной вентиляции легких. Левая грудь побрился и 1,5 см разрез по середине подмышечной линии выполнен в коже. Левый большой грудной мышцы прямо dissociated до ребра подвергаются. Мышечные слои тянут в сторону и фиксируют веко-втягивающим. После этих приготовлений, левой торакотомии выполняется между третьим и четвертым ребрами для визуализации передней поверхности сердца и левого легкого. Проксимального отдела артерии ДМС затем лигировали с 7-0 ethilon шов, который обычно вызывает инфаркт размером ~ 40% левого желудочка. В конце концов, грудь закрыта и животные получают послеоперационного обезболивания (Temgesic, 0,3 mg/50 мл, IP). Животные находятся в теплых клетке, пока спонтанное выздоровление.

протокол

1. Текст протокола

  1. Прежде чем приступить к операции, анестезию самца мыши (C57BL / 6), что составляет 6 недель и старше при вдыхании 2-5% изофлурана. Выполните ноги щепотку, чтобы подтвердить, что животное достаточно наркозом.
  2. Бессознательном мыши помещается на спине на теплом площадку для поддержания постоянной температуры 37 ° C. Грудных груди с левой стороны побрился.
  3. Закрепить мыши, чтобы интубации устройство с изофлуран заполненные камеры. Вставьте трубку в 0,2 внутреннего диаметра в трахею мыши через рот, затем поместите интубированных мыши на асептическую хирургической области (37 ° С регулятором температуры) и подключить эндотрахеальной трубки, чтобы вентилятор (скорость 120 в мин, давление 4-6 MMH 2 O); дезинфекции области с бетадин и 75% этанола.
  4. Применение глазной мази для глаз мыши. Место стандартных ЭКГ-электродов на лапах и подключить мышь к записи ЭКГ.
  5. Используйте стерильные ножницы, чтобы сделать 1,5 см разрез по средней подмышечной линии. Ножницы используются, а не скальпелем, чтобы избежать повреждения подлежащих тканей у мышей. Затем, с помощью тупого кончика ножниц судна, чтобы анализировать и отказаться от грудных мышц от стенки грудной клетки.
  6. Выполните левой торакотомии между третьим и четвертым ребрами для визуализации передней поверхности сердца и левого легкого
  7. Далее убрать грудной стенки с использованием подходящего втягивающего в целях улучшения визуализации и доступность. Удалить перикарда с помощью зубчатого щипцы и тупым наконечником ножницы.
  8. Лигируют левой коронарной артерии, поставив иглу (с приложением 7-0 шва ethilon) под артерией с группой миокарда между лигатурой и артерии. Успешное окклюзии коронарной артерии проверяется гипокинезия / акинезия из передней стенки левого желудочка и изменений ЭКГ (например, с подъемом сегмента ST, QRS broadeniнг)
  9. Закройте груди, поставив два стежка (6-0 ethilon шва) на третьем и четвертом ребрах.
  10. Используйте 5-0 ethilon шов, чтобы закрыть кожи.
  11. Для послеоперационного обезболивания, администрирование однократного внутрибрюшинного введения бупренорфина (0,05 мг / кг). Животные спонтанно выздоравливают в течение 2-5 мин после остановки изофлуран анестезии. Наконец, поместите курсор в теплую клетку и обеспечивает 0,6 мг / мл бупренорфина в питьевой воде (наложение текста: 0,6 мг / мл в питьевой воде), чтобы предотвратить послеоперационные бедствия. Внимательно следить за мышь в течение первых 24 часов после операции.
  12. Эхокардиография проводится для оценки функции сердца через 3 дня после инфаркта миокарда. Успешная процедура проверяется акинезия в передней стенки левого желудочка (см. прилагаемую видео в результаты). В конце эксперимента, в центре будут собираться и храниться в-80oC для дальнейших исследований. Т.е. экспрессии генов.

Результаты

Инструмент Описание функций
Blunt наконечником ножницы Используется для резки кожи, межреберных мышц груди, и швы
Глаз втягивающего Используется для подвергать хирургическому зрения
Blunt наконечником щипцы ?...

Обсуждение

Хирургические процедуры ДМС перевязки, как показано в настоящем докладе является надежным и воспроизводимым методом индукции экспериментального инфаркта миокарда у 3 мышей, 6. Перевязка ДМС в соответствии с этим протоколом вызывает ишемию миокарда привлечения обычно ~ 40% левого ...

Раскрытие информации

Нет конфликта интересов объявлены.

Ссылки

  1. Tabrizchi, R. Beta-blocker therapy after acute myocardial infarction. Expert Rev. Cardiovasc. Ther. 11, 293-296 (2013).
  2. Pell, S., Fayerweather, W. E. Trends in the incidence of myocardial infarction and in associated mortality and morbidity in a large employed population, 1957-1983. N. Engl. J. Med. 312, 1005-1011 (1985).
  3. Ramunddal, T., Gizurarson, S., Lorentzon, M., Omerovic, E. Antiarrhythmic effects of growth hormone--in vivo evidence from small-animal models of acute myocardial infarction and invasive electrophysiology. J. Electrocardiol. 41, 144-151 (2008).
  4. Thom, T., Haase, N., Rosamond, W., Howard, V. J., Rumsfeld, J., Manolio, T., Zheng, Z. J., Flegal, K., O'Donnell, C., Kittner, S., et al. Heart disease and stroke statistics--2006 update: A report from the american heart association statistics committee and stroke statistics subcommittee. Circulation. 113, 85-151 (2006).
  5. van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 289, 1291-1300 (2005).
  6. Omerovic, E., Ramunddal, T., Lorentzon, M., Nordlander, M. Effects of neuropeptide y2 receptor blockade on ventricular arrhythmias in rats with acute myocardial infarction. Eur. J. Pharmacol. 565, 138-143 (2007).
  7. Ahn, D., Cheng, L., Moon, C., Spurgeon, H., Lakatta, E. G., Talan, M. I. Induction of myocardial infarcts of a predictable size and location by branch pattern probability-assisted coronary ligation in c57bl/6 mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 286, 1201-1207 (2004).
  8. Lindbom, M., Ramunddal, T., Camejo, G., Waagstein, F., Omerovic, E. In vivo effects of myocardial creatine depletion on left ventricular function morphology and lipid metabolism: Study in a mouse model. J. Card Fail. 14, 161-166 (2008).
  9. Omerovic, E., Bollano, E., Basetti, M., Kujacic, V., Waagstein, L., Hjalmarson, A., Waagstein, F., Soussi, B. Bioenergetic, functional and morphological consequences of postinfarct cardiac remodeling in the rat. J. Mol. Cell. Cardiol. 31, 1685-1695 (1999).
  10. Gao, E., Lei, Y. H., Shang, X., Huang, Z. M., Zuo, L., Boucher, M., Fan, Q., Chuprun, J. K., Ma, X. L., Koch, W. J. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circ. Res. 107, 1445-1453 (2010).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

73

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены