JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

A protocol for producing a large area of nanopatterned substrate from small nanopatterned molds for study of nanotopographical modulation of cell behavior is presented.

Аннотация

Substrate nanotopography has been shown to be a potent modulator of cell phenotype and function. To dissect nanotopography modulation of cell behavior, a large area of nanopatterned substrate is desirable so that enough cells can be cultured on the nanotopography for subsequent biochemical and molecular biology analyses. However, current nanofabrication techniques have limitations to generate highly defined nanopatterns over a large area. Herein, we present a method to expand nanopatterned substrates from a small, highly defined nanopattern to a large area using stitch technique. The method combines multiple techniques, involving soft lithography to replicate poly(dimethylsiloxane) (PDMS) molds from a well-defined mold, stitch technique to assemble multiple PDMS molds to a single large mold, and nanoimprinting to generate a master mold on polystyrene (PS) substrates. With the PS master mold, we produce PDMS working substrates and demonstrate nanotopographical modulation of cell spreading. This method provides a simple, affordable yet versatile avenue to generate well-defined nanopatterns over large areas, and is potentially extended to create micro-/nanoscale devices with hybrid components.

Введение

A number of recent findings reveal that substrate nanotopography has pronounced influence on cell behavior, from cell adhesion, spreading and migration, to proliferation and differentiation1-6. For instance, a smaller cell size and lower proliferation rate have been observed in cells cultured on deep nanogratings, even leading to apoptosis although the cell alignment, elongation and migration were enhanced, compared with the flat controls2,7-10. Moreover, nanotopography has been shown to facilitate the differentiation of stem cells into certain lineages such as neuron2,11,12, muscle13, and bone3,4. In addition, because of increasing concerns on the toxicity of engineered nanomaterials14,15, there is a need to incorporate nanotopography into physiologically relevant in vitro models for accurate risk assessment of nanomaterials. To fulfil the biochemical and molecular biology analyses, enough cells are needed to be grown on a large area of nanopatterned substrate. However, conventional nanofabrication techniques have limitations to generate highly defined nanopatterns over a large area.

Self-assembly including colloid lithography16 and polymer demixing17 can readily generate large-area nanostructures at low costs. Because self-assembly relies on interactions between the assembling elements such as colloidal particles and macromolecules, and possible interactions between these elements and substrate, it cannot be a stand-alone method of producing nanostructures with precise spatial positioning and arbitrary shapes18. The accompanied high density of defects is also a drawback. Precise spatial control of nanopatterns can be achieved by employing templated self-assembly, which uses top-down lithographic approaches to provide the topographical and/or chemical template to guide the bottom-up assembly of the assembling elements19-21. Alternative nanofabrication techniques such as step-and-flash lithography22 and a roll-to-roll nanoimprinting lithography23 have been developed but have limited use because of their sophisticated process or the requirement of specialized equipment. Nevertheless, a template or a master mold with defined nanoscale patterns is needed for templated or alternative nanofabrication techniques.

Such templates and master molds are conventionally generated by using focused electron, ion, or photon beam lithography. For instance, electron beam lithography (EBL)24 and focused ion beam lithography25 can generate defined patterns with a sub-5 nm resolution. Two-photon lithography has demonstrated a feature size as small as 30 nm26. Although the focused beam lithography techniques enable generation of well-defined nanoscale structures, the capital investment and the time-consuming, costly process restrict their widespread use in academic research27. Therefore, it is highly desirable to develop enabling yet affordable techniques to produce a large area of nanopatterned surfaces with high fidelity.

We have reported a simple, cost-effective stitch technique for generating a large area of nanopatterned surface from a small well-defined mold28. This protocol provides step-by-step procedure from replication of poly(dimethylsiloxane) (PDMS) molds using an EBL-written pattern, to assembly of multiple PDMS molds into a single large mold, to generation of a master mold on polymeric such as polystyrene (PS) substrates, to production of working substrates. With the expanded nanopatterned substrates, we demonstrated nanotopographical modulation of cell spreading.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

протокол

1. Репликация PDMS Пресс-формы из EBL Mold

  1. Изготовить кремния плесень 29
    1. Спин покрытие 200 мкл полиметилметакрилат (ПММА) раствор на 1 × 1 см кремния (Si) подложки при 2500 оборотах в минуту в течение 1 мин, чтобы сформировать тонкую пленку.
    2. Выпекать пленки ПММА на кремниевой подложке при температуре 180 ° С в течение 2 мин.
    3. Написать разработанный nanopattern на пленке ПММА с помощью сфокусированного электронного пучка на площади дозе 300 мкКл / см 2.
    4. Разработка nanopattern ПММА в разработчика в течение 80 сек.
    5. Депозит nanopattern ПММА с никелевым слоем 50 нм толщины, используя испаритель электронного пучка при выходном напряжении 10 кВ, ток эмиссии 0,5 мА и скорости осаждения 0,5 А / сек.
    6. Снимите часть из ПММА в 20 мл для удаления при 80 ° С в течение 20 мин.
    7. Реактивное ионное травление (РИТ) nanopattern в кремниевую подложку, чтобы получить форму Si нужной глубины.
      Примечание: Газовая смесь Tetrafluoromethane (CF 4) / кислород (O 2) (90% / 10%) на приборе с индукционно - связанной плазмой (ICP) мощностью 400 Вт и RIE мощностью 150 Вт используется для травления кремниевой подложки на глубину 560 нм.
  2. Silanize Si плесень
    1. Помещенный покровного стекла и формы Si в 100 мм PS Петри и передавать их в стеклянном эксикаторе, расположенной в вытяжном шкафу.
    2. Оставьте 10 мкл 1H, 1H, 2H, 2H-Perfluorooctyltrichlorosilane на покровное.
      Внимание: 1H, 1H, 2H, 2H-Perfluorooctyltrichlorosilane может вызвать коррозию кожи и серьезные повреждения глаз. Используйте соответствующие средства индивидуальной защиты (СИЗ).
    3. Накройте чашку Петри частично.
    4. Хранить эксикаторе под вакуумом в течение 5 часов в вытяжном шкафу, чтобы завершить силанизацией пресс-формы Si.
  3. Подготовка PDMS форполимера
    1. Взвесить 10 г PDMS смолы и 1,05 г отвердителя в одноразовом взвешенную лодочку.
    2. Смешайте форполимера PDMS тщательно с использованием пластиковой ложкой.
    3. Дегазировать форполимера PDMS в пластмассовый эксикатор под вакуумом в течение около 20 мин до наблюдается прозрачной смеси.
  4. Репликация PDMS формы
    1. Поместите силанизированы форму Si в 60 мм чашки Петри.
    2. Налейте форполимера PDMS на форме Si в чашке Петри.
    3. Поместите чашку Петри в пластмассовый эксикатор и дегазировать в течение примерно 10 минут, пока все пузырьки исчезают.
    4. Переносят чашку Петри на плитке и вылечить PDMS форполимера при температуре 70 ° С в течение 4 часов.
    5. Лупиться пресс-формы PDMS из формы Si тщательно с помощью пинцета.
      Примечание: PDMS формы можно хранить в условиях окружающей среды в течение одной недели. После отверждения, есть некоторые несшитые молекулы PDMS смолы и остаточного отвердитель в формах PDMS 30. Молекулы с низкой молекулярной массой будет постепенно диффундировать и накапливаются на поверхности в течение долгого времени. Это влияет на топографические и механические свойства поверхности PDMS 31. дифСлияние не имеет существенного значения в течение одной недели.

2. Строчка из PDMS Пресс-формы в крупные, одиночные Mold

  1. Подготовьте несколько PDMS формы, повторите шаг 1.4.
    Примечание: Взвесить такое же количество PDMS смеси каждый раз, когда для получения PDMS слепки той же толщины.
  2. Определить ориентацию анизотропных PDMS nanopatterns такие как нанорешётки под оптическим микроскопом и пометить его на обратной стороне пресс-формы PDMS с маркером.
    Примечание: Не следует отметить ориентацию изотропной nanotopography, таких как nanopillars.
  3. Очистите подложку Si с этанолом в вытяжном шкафу и просушите его сжатым воздухом.
  4. Обрежьте без рисунка областей каждого PDMS формы с лезвием.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Для получения форм PDMS, которые будут размещены на периферии сшитой формы, только без рисунка участки, находящиеся в контакте с другими людьми должны быть обрезаны.
  5. Поместите обрезанного PDMS формы с nanopattern лицевой стороной вниззеркало сторона кремниевой подложки, а затем выровнять другие формы вблизи, но не задевая окружающую форму (ы).
  6. Приготовьте клеевой слой PDMS
    1. Литой 1 г дегазированной PDMS форполимера (PDMS смолу и отверждающий агент соотношение: 10: 1,05) на чистую предметное стекло (7,5 см × 2,5 см), чтобы сформировать толстый слой толщиной 0,5 мм.
    2. Выпечка слой PDMS при 100 ° С на плитке в течение 3-5 мин. Используйте иглу, чтобы коснуться слой и убедитесь, что слой частично, но не полностью излечен.
      Примечание: частично отвержденной ПДМС не может течь, как неотвержденного PDMS форполимера, но это является липким по сравнению с излеченных PDMS.
  7. Поместите слой PDMS на обратной стороне выровненных PDMS формы и быстро инвертировать эту сборку и передать его на конфорке.
  8. Нанесите сжимающее усилие (5 кПа) с использованием металлического блока на верхней части сборки, чтобы обеспечить хороший контакт между клеевым слоем PDMS и задней PDMS формы, и вылечить PDMS клеевой слой при температуре 100 ° С в течение 1 ч. <бр /> Примечание: Тщательно отрегулируйте положение металлического блока, чтобы избежать наклона узла.
  9. Снимите металлический блок и снимите одну, сшитую PDMS формы из кремниевой подложки.

3. Генерация Master Mold на PS подложках

Примечание: сшитые ПДМС плесень иммобилизованным на предметном стекле может быть использован для получения мастер-формы на пластине PS или тонкой пленки PS, из которого могут быть изготовлены рабочие наноструктурированных подложек.

  1. Генерация мастер-формы на пластине PS
    1. Подготовьте пластину PS
      1. Сухие гранулы PS в вакуумной печи при 80 ° С в течение двух дней.
      2. Предварительный нагрев пресс-машины при температуре 230 ° С.
      3. Соберите алюминиевый пластину, политетрафторэтилена (ПТФЭ) листа и алюминиевой дистанционной рамки в порядке снизу вверх.
      4. Нагрузка 3,5 г гранул PS в алюминиевой дистанционной рамки с квадратным отверстием 3 см (L) × 3 см (Ш) × 0,3 см (H).
        ПРИМЕЧАНИЕ: Распорка приблизительно 0.1 см толще, чем в PDMS-формы, и, таким образом, окончательный наноструктурированных PS подложка имеет толщину около 0,1 см.
      5. Поместите другой PTFE лист, а затем другой алюминиевая пластина на алюминиевой дистанционной рамки.
      6. Поместите узел в пресс-машине.
      7. Разогреть гранулы PS при 230 ° С в течение 30 мин.
      8. Нанесите сжимающее давление (0,1 МПа) на сборку в течение 5 мин.
      9. Ослабить давление, а затем повторно сжимающей давление 0,5 МПа по сборке.
      10. Повторите шаг 3.1.1.9 с увеличением давления 0,5 МПа до желательного давлении 1,5 МПа достигается.
      11. Выключите обогреватель пресс-машины и охладить его ниже 70 ° С при постоянном давлении 1,5 МПа.
      12. Возьмем сборку, и хранить PS пластину в вакуумной печи при 80 ° С, чтобы предотвратить попадание влаги повторного входа в пластину PS.
    2. Наноимпринт сшитая PDMS формы в PS пластины
      1. Поместите пластину PS в алюминиевой дистанционной рамкиустановить на 3-дюймовой кремниевой пластины.
        Примечание: Внутренние размеры распорки являются такими же, как на PS пластины, так что пластины PS подходит прямо в спейсера.
      2. Нагревают пластину PS на плитке при 250 ° С в течение 30 мин.
      3. Поместите нашит PDMS плесень с nanopatterns лицом вниз на расплавленном PS пластины.
        Примечание: Одна сторона пресс-формы PDMS помещают в контакт с поверхностью пластины PS первой и другая сторона опускается постепенно в контакте с поверхностью PS, чтобы избежать образования пузырьков воздуха на границе.
        Внимание: Поверхность конфорки жарко. Носите thermogloves во время процесса наноимпринтной.
      4. Поместите алюминиевой пластины на стекле из сшитой PDMS формы.
      5. Нанесите сжимающее давление (12,5 кПа) с использованием металлических блоков на алюминиевой пластине, и ждать в течение 3 мин.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что алюминиевая пластина не перекошена.
      6. Поднимите и заменить металлический блок из алюминиевой пластины, и яncrease сжимающего давления до 25 кПа.
      7. Повторите шаг 3.1.2.6 с давление повышали до 50 кПа.
        Примечание: Этот шаг, чтобы удалить воздух, захваченный между формой PDMS и пластиной PS.
      8. Поддерживают температуру конфорки от 240 до 250 ° С под давлением последовательно 50 кПа в течение 15 мин.
      9. Выключите конфорку и остывают всю установку.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Вентилятор может быть использован для ускорения процесса охлаждения.
      10. Удалите металлические блоки после того, как температура ниже 50 ° C, и осторожно снимите сшитый PDMS плесень от пластины PS.
        Примечание: PS подложка имеет обратную nanopatterns и может быть использован в качестве мастер-формы, чтобы производить рабочие PDMS субстратов.
  2. Генерация мастер-формы на тонкой пленке PS
    1. Приготовьте тонкую пленку PS
      1. Растворить 1 г PS в 10 мл толуола в вытяжном шкафу.
        Внимание: Толуол может вызвать irritatio кожип и серьезное повреждение глаз, и может привести к повреждению органов при длительном или неоднократном воздействии. Используйте соответствующие средства индивидуальной защиты.
      2. Спин-пальто 1 мл раствора PS на 2-х в пластине при 2500 оборотах в минуту в течение 1 мин с образованием ~ 1 мкм PS тонкой пленки.
      3. Выпаривают толуол из фильма, установив пленку PS на кремниевой пластине в вытяжном шкафу в течение 3-х дней.
      4. Прокалить тонкую пленку PS в вакуумной печи при 80 ° С в течение ночи.
    2. Наноимпринт PDMS формы на тонкой пленке PS
      1. Поместите нашит PDMS формы с nanotopography лицом вниз на тонкой пленке PS, которая устанавливается на плитке.
      2. Нанесите сжимающее давление 12 кПа на форме PDMS с использованием металлических блоков на стеклянной стороне формы PDMS.
      3. Повышение температуры плитке до 180 ° С и поддерживают ее в течение 15 мин.
        Внимание: Расплавленный PS пленка может функционировать в качестве смазочного материала. Обратите внимание, чтобы предотвратить металлические блоки от соскальзывания.
      4. Выключите конфоркуи остывают всю установку.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Вентилятор может быть использован для ускорения процесса охлаждения.
      5. Удалите металлические блоки после того, как температура опускается ниже 50 ° C, и осторожно снимите сшитый PDMS плесень из фильма PS.
        Примечание: Фильм наноструктурированных PS будет служить в качестве основной формы для производства рабочих PDMS субстратов.

4. Nanotopographical модуляции клеточного поведения

Примечание: Человеческие эпителиальные клетки культивируют на представительные nanotopographies продемонстрировать nanotopographical модуляции клеточного распространения.

  1. Литой PDMS рабочие подложки из основной формы, полученной с шагом 3.1 или 3.2 в зависимости от применения.
  2. Использование полой стальной арочный удар, перерезать наноструктурированных PDMS субстраты на диски , чтобы соответствовать конфигурации конкретного мульти-луночного планшета (например, 24-луночного планшета).
  3. Используйте пинцет, чтобы поместить диски PDMS в лунки офа мульти-луночного планшета.
  4. Стерилизация подложек PDMS с использованием 70% этанола, а затем воздействие УФ лучей, каждый из которых в течение 30 мин.
  5. Промыть PDMS субстратов с 1х стерильным фосфатно-буферным солевым раствором (PBS) в три раза.
  6. Покрывают PDMS субстратов с белком внеклеточного матрикса (например, 20 мкг / мл фибронектина) в течение 30 мин при комнатной температуре.
  7. Промыть PDMS подложек три раза стерильной PBS, каждый из которых в течение 5 мин.
  8. Приостановка клеток человека А549 рака легких в модифицированной Дульбекко среде Игла с 10% фетальной телячьей сыворотки и подсчета клеток с помощью гемоцитометра.
  9. Пластина клеток при плотности высева 2000 клеток / см 2 на PDMS субстратов и культуры их при температуре 37 ° С в увлажненной атмосфере , содержащей 5% CO 2 в течение одного дня.
  10. Промывают клетки с PBS три раза.
  11. Зафиксировать клетки , в смеси 4% параформальдегида и 2% глутаровым альдегидом в PBS в течение 4 часов и обезвоживают клетки с использованием СО 2 критической роINT сушилка для сканирующего электронного микроскопического наблюдения 29.
    Внимание: параформальдегид и глутаровый альдегид может вызвать серьезные ожоги кожи и повреждения глаз. Эксплуатация в химической капот и носить соответствующие средства индивидуальной защиты.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Результаты

Техника стежка может генерировать большую площадь наноструктурированных подложек с высокой точностью. На рисунке 1а и 1b отобразить большую площадь nanopatterns переданных из прошитой PDMS формы на пластины PS и PS тонкой пленки на подложке Si соответствен?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Обсуждение

Мы представляем простой, доступный, но универсальный метод для создания большой площади наноструктурированных подложки. Для того, чтобы точно расширить высоко определенные nanopatterns, большое внимание следует уделить несколько важных шагов. Первый из них является обрезать несколько PDMS ф...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Раскрытие информации

The authors have nothing to disclose.

Благодарности

This work was partly supported by NSF CBET 1227766, NSF CBET 1511759, and Byars-Tarnay Endowment. We gratefully acknowledge use of the West Virginia University Shared Research Facilities which are supported, in part, by NSF EPS-1003907.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
JEOL field emission SEMJEOLJSM-7600FEBL
E-beam evaporatorKurt J. LeskerModel: LAB 18 e-beam evaporatornickel deposition
Trion Minilock III ICP/RIETrion technologyModel: Minilock-phantom III
Press machinePHI Hydraulic PressMolde: SQ-230H
Spin coaterLaurell TechnologiesModle: WS-400A-6NPP-LITE
CO2 critical dryerTousimisModle: Autosamdri-815
Silicon waferUniversity Wafer1080
Aluminum platesMcMaster-carr9057K123
Teflon sheetsMcMaster-carr8711K92
100 mm Petri dishFALCON353003
60 mm Petri dishFALCON353004
Glass coverslipFisher Scientific12-542-B
Glass slideFisher Scientific12-550-34
Disposable weighing boatsFisher Scientific13-735-743
Glass desiccatorFisher Scientific02-913-360
Plastic desiccatorBel-Art ProductsF42025-000
HotplateFisher Scientific1110049SH
TweezerTed Pella, inc.5726
BladeFisher ScientificS17302
Metal blocksMcMaster-carr
PunchBrettuns Village Leather Craft SuppliesArch punch
Poly(methyl methacrylate)MicroChem495 PMMA A4
PDMSDow CorningSylgard 184 kit
PolystyreneDow ChemicalStyron 685D
1H,1H,2H,2H-perfluorooctylmethyldichlorosilaneOakwood Chemical7142
DeveloperMicroChemMIBK/IPA at 1: 3 ratio
RemoverMicroChemRemover PG
EthanolFisher ScientificBP2818500
TolueneFisher ScientificT324-500
Phosphate buffered salineSigma AldrichD8537
Dulbecco’s modified eagle mediumSigma AldrichD5796
Fetal bovine serumAtlanta BiologicalsS11550
ParaformaldehydeElectron Microsopy Science15712-S
Glutaraldehyde Fisher ChemicalG151-1
FibronectinCorning356008
A549 cellsATCCATCC CCL-185

Ссылки

  1. Silva, G. A., et al. Selective differentiation of neural progenitor cells by high-epitope density nanofibers. Science. 303 (5662), 1352-1355 (2004).
  2. Yim, E. K. F., Pang, S. W., Leong, K. W. Synthetic Nanostructures Inducing Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Neuronal Lineage. Exp. Cell Res. 313 (9), 1820-1829 (2007).
  3. Dalby, M. J., et al. The Control of Human Mesenchymal Cell Differentiation Using Nanoscale Symmetry and Disorder. Nat. Mater. 6 (12), 997-1003 (2007).
  4. Oh, S., et al. Stem Cell Fate Dictated Solely by Altered Nanotube Dimension. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 106 (7), 2130-2135 (2009).
  5. Brunetti, V., et al. Neurons Sense Nanoscale Roughness with Nanometer Sensitivity. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 107 (14), 6264-6269 (2010).
  6. McMurray, R., et al. Nanoscale Surfaces for the Long-term Maintenance of Mesenchymal Stem Cell Phenotype and Multipotency. Nat. Mater. 10 (8), 637-644 (2011).
  7. Yim, E. K. F., et al. Nanopattern-induced changes in morphology and motility of smooth muscle cells. Biomaterials. 26 (26), 5405-5413 (2005).
  8. Gerecht, S., et al. The Effect of Actin Disrupting Agents on Contact Guidance of Human Embryonic Stem Cells. Biomaterials. 28 (28), 4068-4077 (2007).
  9. Bettinger, C. J., Zhang, Z., Gerecht, S., Borenstein, J. T., Langer, R. Enhancement of in vitro Capillary Tube Formation by Substrate Nanotopography. Adv. Mater. 20 (1), 99-103 (2008).
  10. Thakar, R. G., Ho, F., Huang, N. F., Liepmann, D., Li, S. Regulation of vascular smooth muscle cells by micropatterning. Biochem. Biophys. Res. Commun. 307 (4), 883-890 (2003).
  11. Lee, M. R., et al. Direct differentiation of human embryonic stem cells into selective neurons on nanoscale ridge/groove pattern arrays. Biomaterials. 31 (15), 4360-4366 (2010).
  12. Moe, A. A. K., et al. Microarray with micro- and nano-topographies enables identification of the optimal topography for directing the differentiation of primary murine neural progenitor cells. Small. 8 (19), 3050-3061 (2012).
  13. Dang, J. M., Leong, K. W. Myogenic induction of aligned mesenchymal stem cell sheets by culture on thermally responsive electrospun nanofibers. Adv. Mater. 19 (19), 2775-2779 (2007).
  14. Dasgupta, N., et al. Thermal co-reduction approach to vary size of silver nanoparticle: its microbial and cellular toxicology. Environ. Sci. Pollut. Res. 23 (5), 4149-4163 (2016).
  15. Ranjan, S., et al. Microwave-irradiation-assisted hybrid chemical approach for titanium dioxide nanoparticle synthesis: microbial and cytotoxicological evaluation. Environ. Sci. Pollut. Res. 23 (12), 12287-12302 (2016).
  16. Deckman, H. W., Dunsmuir, J. H. Natural lithography. Appl. Phys. Lett. 41 (4), 377-379 (1982).
  17. Dalby, M. J., Riehle, M. O., Johnstone, H., Affrossman, S., Curtis, A. S. G. In vitro Reaction of Endothelial Cells to Polymer Demixed Nanotopography. Biomaterials. 23 (14), 2945-2954 (2002).
  18. Gates, B. D., et al. New approaches to nanofabrication: molding, printing, and other techniques. Chem. Rev. 105 (4), 1171-1196 (2005).
  19. Yin, Y., Lu, Y., Gates, B., Xia, Y. Template-Assisted Self-Assembly: A Practical Route to Complex Aggregates of Monodispersed Colloids with Well-Defined Sizes, Shapes, and Structures. J. Am. Chem. Soc. 123 (36), 8718-8729 (2001).
  20. Tada, Y., et al. Directed Self-Assembly of Diblock Copolymer Thin Films on Chemically-Patterned Substrates for Defect-Free Nano-Patterning. Macromolecules. 41 (23), 9267-9276 (2008).
  21. Cheng, J. Y., Rettner, C. T., Sanders, D. P., Kim, H. C., Hinsberg, W. D. Dense self-assembly on sparse chemical patterns: rectifying and multiplying lithographic patterns using block copolymers. Adv. Mater. 20 (16), 3155-3158 (2008).
  22. Colburn, M., et al. Step and flash imprint lithography: a new approach to high-resolution patterning. Proc. SPIE. 3676 ((Pt. 1, Emerging Lithographic Technologies III)), 379-389 (1999).
  23. Ahn, S. H., Guo, L. J. High-speed roll-to-roll nanoimprint lithography on flexible plastic substrates. Adv. Mater. 20 (11), 2044-2049 (2008).
  24. Vieu, C., et al. Electron beam lithography: resolution limits and applications. Appl. Surf. Sci. 164, 111-117 (2000).
  25. Nagase, T., Gamo, K., Kubota, T., Mashiko, S. Direct fabrication of nano-gap electrodes by focused ion beam etching. Thin Solid Films. 499 (1-2), 279-284 (2006).
  26. Juodkazis, S., et al. Two-photon lithography of nanorods in SU-8 photoresist. Nanotechnology. 16 (6), 846(2005).
  27. Yang, Y., Leong, K. W. Nanoscale surfacing for regenerative medicine. Wiley Interdiscip. Rev. Nanomed. Nanobiotechnol. 2 (5), 478-495 (2010).
  28. Yang, Y., Kulangara, K., Sia, J., Wang, L., Leong, K. W. Engineering of a Microfluidic Cell Culture Platform Embedded with Nanoscale Features. Lab Chip. 11 (9), 1638-1646 (2011).
  29. Wang, K., et al. Nanotopographical modulation of cell function through nuclear deformation. Acs Appl. Mater. Inter. 8 (8), 5082-5092 (2016).
  30. Lee, J. N., Park, C., Whitesides, G. M. Solvent Compatibility of Poly(dimethylsiloxane)-Based Microfluidic Devices. Anal. Chem. 75 (23), 6544-6554 (2003).
  31. Yang, Y., Kulangara, K., Lam, R. T. S., Dharmawan, R., Leong, K. W. Effects of Topographical and Mechanical Property Alterations Induced by Oxygen Plasma Modification on Stem Cell Behavior. ACS Nano. 6 (10), 8591-8598 (2012).
  32. Hua, F., et al. Polymer Imprint Lithography with Molecular-Scale Resolution. Nano Lett. 4 (12), 2467-2471 (2004).
  33. Delamarche, E., Schmid, H., Michel, B., Biebuyck, H. Stability of molded polydimethylsiloxane microstructures. Adv. Mater. 9 (9), 741-746 (1997).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

118Nanopattern

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены