JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Настоящий протокол описывает модель повреждения легких у мышей, использующих олеиновую кислоту для имитации острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС). Эта модель увеличивает медиаторы воспаления при отеке и снижает податливость легких. Олеиновая кислота используется в форме соли (олеата), так как эта физиологическая форма позволяет избежать риска эмболии.

Аннотация

Острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС) представляет значительную угрозу для тяжелобольных пациентов с высоким уровнем летальности. Воздействие загрязняющих веществ, сигаретный дым, инфекционные агенты и жирные кислоты могут вызвать ОРДС. Животные модели могут имитировать сложный патомеханизм ОРДС. Однако у каждого из них есть ограничения. Примечательно, что олеиновая кислота (ОА) повышена у пациентов в критическом состоянии с вредным воздействием на легкие. ОА может вызывать повреждение легких эмболией, разрушая ткани, изменяя pH и ухудшая клиренс отека. Модель ОА-индуцированного поражения легких напоминает различные особенности ОРДС с повреждением эндотелия, повышенной альвеолярной проницаемостью, воспалением, образованием мембранного гиалина и гиалиновой гибелью клеток. При этом индукция повреждения легких описывается путем введения ОА (в форме соли) непосредственно в легкие и внутривенно мыши, поскольку это физиологическая форма ОА при рН 7. Таким образом, инъекция ОА в солевой форме является полезной животной моделью для изучения повреждения легких/ОРДС, не вызывая эмболии и не изменяя рН, тем самым приближаясь к тому, что происходит у пациентов в критическом состоянии.

Введение

Ashbaugh et al.1 в 1967 году впервые описали острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС) и с тех пор претерпели множество пересмотров. Согласно берлинскому определению, ОРДС – это воспаление легких, которое приводит к острой дыхательной недостаточности и гипоксемии (PaO2/FiO 2 > 300 мм рт. ст.) из-за дисбаланса вентиляции и перфузии, диффузного двустороннего альвеолярного повреждения (DAD) и инфильтрата, увеличения массы легких и отека 2,3. Легочная паренхима представляет собой сложную клеточную среду, состоящую из эпителиальных, эндотелиальных и других клеток. Эти клетки образуют барьеры и структуры, отвечающие за газообмен и гомеостаз в альвеолах3. Наиболее распространенными клетками в эпителиальном барьере являются альвеолярные клетки I типа (AT1) с большей площадью поверхности для газообмена и управления жидкостью с помощью Na/K-АТФазы. Кроме того, альвеолярные клетки II типа (AT2) вырабатывают поверхностно-активное вещество, снижающее поверхностное натяжение в альвеолах4. Под ними эндотелиальные клетки образуют полупроницаемый барьер, отделяющий легочное кровообращение от интерстиция. Его функции включают обнаружение стимулов, координацию воспалительных реакций и клеточную трансмиграцию5. Эндотелиальные клетки также регулируют газообмен, сосудистый тонус и коагуляцию5. Таким образом, нарушения функции эндотелия и эпителия могут усугубить провоспалительный фенотип, вызывая повреждение легких, приводящее к ОРДС5.

Риск развития ОРДС связан с бактериальной и вирусной пневмонией или косвенными факторами, такими как нелегочный сепсис, травма, переливание крови и панкреатит6. Эти условия вызывают высвобождение молекулярных паттернов, ассоциированных с патогенами (PAMP) и молекулярных паттернов, связанных с повреждением (DAMP), индуцируя провоспалительные цитокины и хемокины, такие как TNF-α, IL-1β, IL-6 и IL-85. TNF-α связан с деградацией сосудисто-эндотелиального кадгерина (VE-кадгерина) при нарушении эндотелиального барьера и инфильтрации лейкоцитов в паренхиму легких. Нейтрофилы являются первыми клетками, которые мигрируют, привлекаемые IL-8 и LTB4 5,7,8. Нейтрофилы дополнительно увеличивают образование провоспалительных цитокинов, активных форм кислорода (АФК)9 и внеклеточных ловушек нейтрофилов (НВЛ), что приводит к дополнительному повреждению эндотелия и эпителия10. Повреждение эпителия вызывает воспаление и активацию Toll-подобных рецепторов в клетках AT2 и резидентных макрофагах, индуцируя высвобождение хемокинов, привлекающих воспалительные клетки в легкие. Кроме того, выработка цитокинов, таких как интерферон-β (INFβ), вызывает рецепторы, индуцирующие апоптоз (TRAIL), связанные с TNF, что приводит клетки ATII к апоптозу, ухудшая жидкость и ионный кларенс4. Нарушение структуры эндотелиального и эпителиального барьеров способствует притоку жидкости, белков, эритроцитов и лейкоцитов в альвеолярное пространство, вызывая отеки. При установлении отека изменяется легочное усилие для поддержания дыхания и газообмена11. Гиперкапния и гипоксемия индуцируют гибель клеток и нарушение транспорта натрия, усугубляя альвеолярный отек из-за плохой способности клиренса10. ОРДС также имеет повышенный уровень IL-17A, связанный с дисфункцией органов, повышенным процентом альвеолярных нейтрофилов и альвеолярной проницаемостью9.

В последние годы наблюдается постоянный прогресс в исследованиях патофизиологии, эпидемиологии и лечения ОРДС12,13. Тем не менее, ОРДС является гетерогенным синдромом, несмотря на прогресс в терапевтических исследованиях, приводящий к оптимизации искусственной вентиляции легких и инфузионной терапии. Таким образом, по-прежнемунеобходимо более эффективное прямое фармакологическое лечение, а исследования на животных могут помочь раскрыть механизмы ОРДС и мишени для вмешательства.

Современные модели ОРДС не способны полностью воспроизвести патологию. Таким образом, исследователи часто выбирают ту модель, которая могла бы лучше соответствовать их интересам. Например, модель индукции липополисахаридов (ЛПС) индуцирует ОРДС путем эндотоксического шока, вызванного в основном TLR414. Индукция HCl имитирует аспирацию кислоты, и повреждение является нейтрофильным14. С другой стороны, текущая модель олеата натрия индуцирует повреждение эндотелия, которое увеличивает проницаемость сосудов и отек. Кроме того, использование олеата натрия вместо олеиновой кислоты в жидкой форме позволяет избежать риска эмболии и изменения рНкрови 15.

Модели животных для ОРДС
Доклинические исследования на животных моделях помогают понять патологию и имеют важное значение для новых исследований методов лечения ОРДС. Идеальная животная модель должна обладать характеристиками, сходными с клинической ситуацией, и хорошей воспроизводимостью механизмов заболевания с соответствующими патофизиологическими особенностями каждой стадии заболевания, его эволюциии репарации. Для доклинической оценки острого повреждения легких при ОРДС используется несколько животных моделей. Однако, поскольку все модели имеют ограничения, они не могут полностью воспроизвести патологию человека 6,14,16. ОРДС, индуцированный олеиновой кислотой, применяется у различных видов животных17. У свиней18, овец19 исобак 20, которым была введена инъекция ОА, наблюдаются многочисленные клинические признаки заболевания с дисфункцией альвеолярно-капиллярной мембраны и повышенной проницаемостью с белковой и клеточной инфильтрацией.

Например, при ОА в дозе 1,25 мкМ внутривенно вводится заблокированный трансэпителиальный транспорт, приводящий к альвеолярному отеку15. В качестве альтернативы, в модели in vitro с использованием клеток А549, ОА в концентрации 10 мкМ не изменял эпителиальный натриевый канал (eNAC) или экспрессию Na/K-АТФазы. Тем не менее, ОА, по-видимому, ассоциируется с обоими каналами, непосредственно подавляя их активность21. Внутривенное введение ОА в дозе 0,1 мл/кг вызывало застой и отек легочной ткани, уменьшало альвеолярные пространства с утолщенными альвеолярными перегородками и увеличивало количество воспалительных и эритроцитов22. Кроме того, ОА индуцировал апоптоз и некроз в эндотелиальных и эпителиальных клетках легкого15. Введение раствора трис-олеата интратрахеально мышам усиливало инфильтрацию нейтрофилов и отек уже через 6 ч после стимуляции23. Инъекция ОА через 24 ч повышала уровень провоспалительных цитокинов (т.е. TNF-α, IL-6 и IL-1β)23. Кроме того, внутривенное (орбитальное сплетение) введение 10 мкМ трис-олеата ингибирует легочную активность Na/K-АТФазы, аналогично уабаину при 10-3 мкМ, селективному ингибитору фермента. Кроме того, ОА индуцирует воспаление с клеточной инфильтрацией, образованием липидных тел и выработкой лейкотриена В4 (ЛТБ4) и простагландина Е2 (ПГЕ2)22,24. Таким образом, ОРДС, индуцированный олеиновой кислотой, вызывает отек, кровоизлияние, инфильтрацию нейтрофилов, повышение активности миелопероксидазы (МПО) и АФК24. Таким образом, введение ОА является хорошо зарекомендовавшей себя моделью повреждения легких22,25. Все результаты, представленные в этой статье, в которых ОА представляет собой форму соли, олеат натрия.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

протокол

Процедуры, использованные в данном исследовании, были одобрены Комитетом по этике использования животных Фонда Освальдо Круза (лицензии CEUA No 002-08, 36/10 и 054/2015). Для экспериментов использовались самцы швейцарских мышей Webster весом от 20 до 30 г, предоставленные Институтом науки и технологий в биомоделях (ICTB) Фонда Освальдо Круза (FIOCRUZ). Животные содержались в вентилируемых изоляторах в виварии Pavilhão Ozório de Almeida, а вода и еда были доступны ad libitum. Они подвергались воздействию 12-часового/12-часового цикла света и темноты.

1. Приготовление раствора олеата натрия

  1. Используйте олеиновую кислоту для приготовления 100 ммоль/л исходного раствора олеата натрия в любой стерильной пробирке или стеклянной колбе.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Для данной работы был приготовлен раствор объемом 50 мл (окончательный объем), но объем должен быть отрегулирован в соответствии с экспериментальной необходимостью. Раствор нужно всегда готовить в стерильных пробирках или стеклянной таре.
    1. Во-первых, добавьте таблетки или раствор NaOH в сверхчистую воду, чтобы повысить pH. Значение рН 12-13 рекомендуется для объема 25 мл.
      ПРИМЕЧАНИЕ: В качестве альтернативы для приготовления раствора Tris-oleate можно использовать основу Tris.
    2. Добавляйте олеиновую кислоту (см. Таблицу материалов) очень медленно, капля за каплей, при постоянном перемешивании в ультразвуковой ванне при 37 °C.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Если выпадает олеиновая кислота в осадок, начните все сначала.
    3. После того, как олеиновая кислота полностью растворится, осторожно отрегулируйте pH до 7,4, капля за каплей при помешивании, сверхчистым разбавленным HCl, а затем доведите до конечного объема 50 мл.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Свежеприготовленные рабочие растворы олеата. В качестве альтернативы раствор можно аликвотировать, хранить и выдерживать при -20 °C в среде, обогащенной азотом, чтобы избежать окисления не более месяца. Избегайте циклов замораживания-повторного замораживания.

2. Индукция поражения легких олеиновой кислотой

  1. Выполняют интратрахеальное введение олеиновой кислоты.
    1. Обезболивайте мышей 5% изофлураном с 2 л/минO2 с помощью ветеринарного испарителя анестезии (рис. 1A). Удалите шерсть в области разреза с помощью крема для депиляции и продезинфицируйте область тремя чередующимися циклами скраба бетадина и спирта с использованием стерильной марли. Подтвердите глубину анестезии защемлением пальца ноги.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Во время процедуры используйте стерильные перчатки и инструменты. Используйте простыню, чтобы накрыть животное, и обнажите только место разреза. Проводите эксперимент в шкафу биологической безопасности, чтобы избежать утечки изофторана в окружающую среду. Анальгетики не назначаются, так как они могут подавлять воспалительную реакцию.
    2. После анестезии уложите животное в позу спинного пролежня и сделайте разрез (0,5-1 см) V-образной формы на уровне щитовидной железы. Осторожно сместите щитовидную железу, чтобы обнажить трахею (рис. 1B) и введите 50 мкл приготовленного раствора олеата (шаг 1).
      ПРИМЕЧАНИЕ: Мыши были разделены на две группы, по восемь животных в каждой группе. Группа с повреждением легких получает раствор натрия-олеата в концентрации 25 мМ (1,25 мкмоль), а контрольная группа получает 50 мкл стерильного физиологического раствора путем закапывания в трахею каждой мыши с помощью инсулинового шприца (объем 300 мкл, 30 г) (рис. 1В).
    3. Зашить место разреза мыши синтетическим нерассасывающимся монофиламентным шовным материалом, вернуть его в клетку и наблюдать за ним до полного восстановления после операции. Во время всех процедур держите животных на грелке при температуре 37 °C.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Мышам обычно требуется до 15 минут, чтобы восстановиться после операции.
  2. Выполняют внутривенное введение олеиновой кислоты.
    1. После анестезии (шаг 2.1.1, рисунок 2A) введите внутривенно в орбитальное сплетение, введя ультратонкую иглу (см. таблицу материалов) в медиальный кантус глазницы (рисунок 2B).
      ПРИМЕЧАНИЕ: Мыши были разделены на две группы, по восемь животных в каждой группе. Каждая группа получает 100 мкл натрий-олеатного раствора из расчета 10 мкмоль ОА на животное, в то время как контрольная группа получает 100 мкл стерильного физиологического раствора.
  3. После операции ежедневно наблюдайте за животными на предмет побочных реакций. Гуманные конечные точки эвтаназии включают побочные реакции, судороги и кому.

3. Сбор жидкости для бронхоальвеолярного лаважа (BALF)

  1. Усыпляют мышей внутрибрюшинной смертельной дозой кетамина (300 мг/кг) и ксилазина (30 мг/кг) (см. таблицу материалов).
  2. Уложите животное в положение спинного пролежня, сделайте хирургическим ножницами разрез примерно 1 см в передней области животного, обнажите трахею и сделайте небольшой надрез для введения внутривенного катетера (20 G).
  3. Подсоедините катетер к стерильному шприцу объемом 1 мл, медленно и постепенно введите в легкие 0,5 мл стерильного физиологического раствора, а затем тем же шприцем аспирируйте жидкость из BALF. Повторите его 3-5 раз, и переложите в стерильную микропробирку, поместив их в лед.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Образцы можно хранить при температуре -20 °C до 6 месяцев.

4. Общий и дифференциальный анализ клеток в BALF

  1. Для общего количества клеток разведите 20 мкл BALF в 180 мкл (10-кратное разведение) раствора Турка (см. таблицу материалов). Подсчет проводят с помощью камеры Нойбауэра под оптическим микроскопом с 40-кратным объективом.
  2. Для дифференциального подсчета помещают 100 мкл BALF в ячеистую воронку, содержащую предметные стекла, и центрифугируют его при 22,86 x g в течение 5 мин при 4 °C в цитоцентрифуге и окрашивают Мэй-Грюнвальд (15%, pH 7,2)-Гимза (1:10) (см. таблицу материалов). Продолжайте подсчет клеток в световом микроскопе с иммерсионным объективом.

5. Определение общего белка в BALF

  1. Определите общий надосадочный белок BALF с помощью коммерческого набора для количественного определения белка и считайте поглощение при длине волны 562 нм с помощью спектрофотометра в соответствии с инструкциями производителя (см. таблицу материалов).

6. Иммуноферментные анализы

  1. Центрифуга BALF при 1 200 x g в течение 10 мин при 4 °C. Затем соберите надосадочную жидкость пипеткой и храните ее при -80 °C для анализа TNF-α, IL-1β, IL-6 и PGE215,23,25.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Центрифугирование на этапе 6.1 делает BALF бесклеточным.
    1. Проведите анализ цитокинов на бесклеточном BALF с помощью коммерческого набора для ИФА в соответствии с инструкциями производителя. Проведите анализ PGE2 с помощью набора для иммуноферментного анализа (ИФА) в соответствии с инструкциями производителя (см. Таблицу материалов).

7. Окрашивание и подсчет липидов в организме

  1. Зафиксируйте лейкоциты на предметных стеклах цитоспина, используя 3,7% формальдегид в Ca 2+, буферный раствор соли Хэнка Mg2+ (HBSS, pH 7,4) и окрасьте 1,5% OsO4 во влажном состоянии3 (см. таблицу материалов). Затем подсчитайте липидные тела на клетку в 50 последовательных лейкоцитах из каждого предметного стекла с помощью линзы масляного объектива микроскопа.

8. Статистический анализ

  1. Выполняйте статистический анализ с помощью программного обеспечения для построения графиков и статистики (см. Таблицу материалов). Выразите результаты в виде среднего значения ± SEM и проанализируйте с помощью односторонней ановы с последующим пост-тестом Newman-Keuls-Student26. Считайте различия значимыми, когда P < 0,05.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Результаты

В неповрежденном легком очищение альвеолярной жидкости происходит за счет транспорта ионов через интактный альвеолярный эпителиальный слой. Осмотический градиент переносит жидкость из альвеол в легочный интерстиций, где она дренируется лимфатическими сосудами или реабсорбируется....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Обсуждение

Выбор правильной модели ОРДС имеет важное значение для проведения доклинических исследований, и лицо, проводящее оценку, должно учитывать все возможные переменные, такие как возраст, пол, методы введения и другие6. Выбранная модель должна воспроизводить заболевание на осн...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

Это исследование было профинансировано Институтом Освальдо Круза, Фондом Освальдо Круза (FIOCRUZ), Грантом 001 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Programa de Biotecnologia da Universidade Federal Fluminense (UFF), Федеральным университетом Рио-де-Жанейро (UNIRIO), Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ), и Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq). Рисунки 1 и 2 созданы с помощью BioRender.com.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
Anesthetic vaporizerSurgiVetmodel 100
Braided slik thread with needle number 5Shalon medicalN/A
Cabinet vivariumInsight Model EB273
CentrifugeEppendorf5430/5430R
CytofunnelThermoFisher11-025-48
Drontal puppyBayerN/A
Hank's balanced SaltsSigma-AldrichH4981
HeatpadtkreproduçãoTK-500
Hydrocloric AcidSigma-Aldrich30721
Insulin syringe UltrafineBD328322
Isoforine 1mL/mLCristáliaN/A
KetamineSyntecN/A
May-Grunwald-GiemsaSigma-Aldrich205435
Micro BCA Protein Assay KitThermoFisher23235
Microscope  PrimoStarCarl Zeiss
Mouse IL-1 beta duoSet ELISAR&D systemDY401
Mouse IL-6 duoSet ELISAR&D systemDY406
Mouse TNF-alpha duoSet ELISAR&D systemDY410
Neubauer chamber improved bright-lineGlobal optics
Oleic Acid (99%)Sigma-AldrichO1008
Osmium tetroxide solution (4%)Sigma-Aldrich75632
Peripheral Intravenous Catherter 20 GBD Angiocath388333
Prism 8 (graphic and statistic software)GraphpadN/A
Prostaglandin E2 ELISA Kit -MonoclonalCayman Chemical514010
Shandon Cytospin 3ThermoFisherN/A
Sodium hydroxideMerck1,06,49,81,000
SpectrophotometerMolecular DevicesSpectraMax ABS plus
Swiss webster miceICTB/FIOCRUZN/A
Syringe 1 mLBD990189
Tris-baseBio Rad161-0719Electrophoresis purity reagent
Türk's solutionSigma-Aldrich93770
XilazineSyntecN/A

Ссылки

  1. Ashbaugh, D. G., Bigelow, D. B., Petty, T. L., Levine, B. E. Acute respiratory distress in adults. Lancet. 2 (7511), 319-323 (1967).
  2. The ARDS Definition Task Force. Acute respiratory distress syndrome: The Berlin definition. JAMA. 307 (23), 2526-2533 (2012).
  3. Hewitt, R. J., Lloyd, C. M. Regulation of immune responses by the airway epithelial cell landscape. Nature Reviews Immunology. 21 (6), 347-362 (2021).
  4. Zepp, J. A., Morrisey, E. E. Cellular crosstalk in the development and regeneration of the respiratory system. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 20 (9), 551-566 (2019).
  5. Millar, F. R., Summers, C., Griffiths, M. J., Toshner, M. R., Proudfoot, A. G. The pulmonary endothelium in acute respiratory distress syndrome: insights and therapeutic opportunities. Thorax. 71 (5), 462(2016).
  6. D'Alessio, F. R. Mouse models of acute lung injury and ARDS. Methods in Molecular Biology. 1809, 341-350 (2018).
  7. Corada, M., et al. Vascular endothelial-cadherin is an important determinant of microvascular integrity in vivo. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 96 (17), 9815-9820 (1999).
  8. Bozza, P. T., et al. Leukocyte lipid body formation and eicosanoid generation: cyclooxygenase-independent inhibition by aspirin. PNAS. 93 (20), 11091-11096 (1996).
  9. Mikacenic, C., et al. Interleukin-17A is associated with alveolar inflammation and poor outcomes in acute respiratory distress syndrome. Critical Care Medicine. 44 (3), 496-502 (2016).
  10. Matthay, M. A., et al. Acute respiratory distress syndrome. Nature Reviews Disease Primers. 5 (1), 18(2019).
  11. Huppert, L. A., Matthay, M. A., Ware, L. B. Pathogenesis of acute respiratory distress syndrome. Seminars in Respiratory and Critical Care Medicine. 40 (1), 31-39 (2019).
  12. Matthay, M. A., McAuley, D. F., Ware, L. B. Clinical trials in acute respiratory distress syndrome: challenges and opportunities. The Lancet Respiratory Medicine. 5 (6), 524-534 (2017).
  13. Fan, E., Brodie, D., Slutsky, A. S. Acute respiratory distress syndrome: advances in diagnosis and treatment. JAMA. 319 (7), 698-710 (2018).
  14. Matute-Bello, G., Frevert, C. W., Martin, T. R. Animal models of acute lung injury. The American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 295 (3), 379-399 (2008).
  15. Gonçalves-de-Albuquerque, C. F., et al. Oleic acid inhibits lung Na/K-ATPase in mice and induces injury with lipid body formation in leukocytes and eicosanoid production. Journal of Inflammation. 10 (1), Lond. 34(2013).
  16. Matthay, M. A., Ware, L. B., Zimmerman, G. A. The acute respiratory distress syndrome). Journal of Clinical Investigation. 122 (8), 2731-2740 (2012).
  17. Wang, H. M., Bodenstein, M., Markstaller, K. Overview of the pathology of three widely used animal models of acute lung injury. European Surgical Research. 40 (4), 305-316 (2008).
  18. Moriuchi, H., Zaha, M., Fukumoto, T., Yuizono, T. Activation of polymorphonuclear leukocytes in oleic acid-induced lung injury. Intensive Care Medicine. 24 (7), 709-715 (1998).
  19. Julien, M., Hoeffel, J. M., Flick, M. R. Oleic acid lung injury in sheep. Journal of Applied Physiology. 60 (2), 433-440 (1986).
  20. Hofman, W. F., Ehrhart, I. C. Permeability edema in dog lung depleted of blood components. Journal of Applied Physiology. 57 (1), 147-153 (1984).
  21. Vadász, I., et al. Oleic acid inhibits alveolar fluid reabsorption: a role in acute respiratory distress syndrome. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 171 (5), 469-479 (2005).
  22. Tenghao, S., et al. Keratinocyte growth factor-2 reduces inflammatory response to acute lung injury induced by oleic acid in rats by regulating key proteins of the wnt/β-catenin signaling pathway. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2020, 8350579(2020).
  23. Gonçalves-de-Albuquerque, C. F., et al. Oleic acid induces lung injury in mice through activation of the ERK pathway. Mediators of Inflammation. 2012, 956509(2012).
  24. Huang, H., et al. Dipyrithione attenuates oleic acid-induced acute lung injury. Pulmonary Pharmacology & Therapeutics. 24 (1), 74-80 (2011).
  25. Goncalves-de-Albuquerque, C. F., Silva, A. R., Burth, P., Castro-Faria, M. V., Castro-Faria-Neto, H. C. acute respiratory distress syndrome: role of oleic acid-triggered lung injury and inflammation. Mediators of Inflammation. 2015, 260465(2015).
  26. McHugh, M. L. Multiple comparison analysis testing in ANOVA. Biochemia Medica (Zagreb). 21 (3), 203-209 (2011).
  27. Swarts, H. G. P., Schuurmans Stekhoven, F. M. A. H., De Pont, J. J. H. H. M. Binding of unsaturated fatty acids to Na+,K+-ATPase leading to inhibition and inactivation. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes. 1024 (1), 32-40 (1990).
  28. Swenson, K. E., Swenson, E. R. Pathophysiology of acute respiratory distress syndrome and COVID-19 lung injury. Critical Care Clinics. 37 (4), 749-776 (2021).
  29. Bozza, P. T., Magalhães, K. G., Weller, P. F. Leukocyte lipid bodies - Biogenesis and functions in inflammation. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular and Cell Biology of Lipids. 1791 (6), 540-551 (2009).
  30. Chen, H., Bai, C., Wang, X. The value of the lipopolysaccharide-induced acute lung injury model in respiratory medicine. Expert Review of Respiratory Medicine. 4 (6), 773-783 (2010).
  31. Martin, T. R., Matute-Bello, G. Experimental models and emerging hypotheses for acute lung injury. Critical Care Clinics. 27 (3), 735-752 (2011).
  32. Schuster, D. P. ARDS: clinical lessons from the oleic acid model of acute lung injury. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 149 (1), 245-260 (1994).
  33. Martins, C. A., et al. The relationship of oleic acid/albumin molar ratio and clinical outcomes in leptospirosis. Heliyon. 7 (3), 06420(2021).
  34. Yu, M. -yal, et al. Hypoalbuminemia at admission predicts the development of acute kidney injury in hospitalized patients: A retrospective cohort study. PLOS ONE. 12 (7), 0180750(2017).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

PHPH 7

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены