Модель перипротезной инфекции сустава Candida albicans у мышей

Резюме

Перипротезная инфекция суставов (ППИ), вызванная опасными патогенами, часто встречается в клинической ортопедии. Существующие животные модели не могут точно смоделировать реальную ситуацию ППИ. Здесь мы создали модель мыши, ассоциированной с биопленкой Candida albicans , для исследования и разработки новых терапевтических средств для лечения ППИ.

Аннотация

Перипротезная инфекция суставов (ППИ) является одной из распространенных инфекций, вызываемых Candida albicans (C. albicans), которая все чаще беспокоит хирургов и ученых. Как правило, в месте инфекции образуются биопленки, которые могут защитить C. albicans от антибиотиков и иммунного клиренса. Хирургическое вмешательство, включающее удаление инфицированного имплантата, санацию, антимикробное лечение и реимплантацию, является золотым стандартом лечения ППИ. Таким образом, создание моделей ППИ на животных имеет большое значение для исследований и разработки новых лекарств или терапевтических средств для лечения ППИ. В этом исследовании гладкая проволока из никель-титанового сплава, широко используемая в ортопедических клиниках, была вставлена в бедренный сустав мыши C57BL/6 до того, как C. albicans были инокулированы в суставную полость вдоль проволоки. Через 14 дней на поверхности имплантатов под сканирующим электронным микроскопом (СЭМ) наблюдались зрелые и толстые биопленки. Значительно сниженная костная трабекула была обнаружена при окрашивании H&E инфицированных образцов суставов. Подводя итог, можно сказать, что была создана мышиная модель PJI, обладающая такими преимуществами, как простота эксплуатации, высокая успешность, высокая повторяемость и высокая клиническая корреляция. Ожидается, что это станет важной моделью для клинических исследований профилактики ППИ, связанной с биопленкой C. albicans.

Введение

Candida albicans (C. albicans) комменсально обитает во многих^{частях тела} человека1, который также является наиболее распространенным условно-патогенным патогеном, вызывающим опасные для жизни инвазивные грибковые инфекции, особенно у пациентов с ослабленным иммунитетом ^2,3. C. albicans может трансформироваться между дрожжами и мицелием в виде полиморфного гриба. Состояние мицелия характеризуется более высокой вирулентностью, более сильной адгезией и инвазией клеток и тканей ^4,5. Кроме того, C. albi....

протокол

Животные были приобретены в Сианьском университете Цзяотун. Все процедуры экспериментов на животных были одобрены Институциональным комитетом по этике животных Сианьского университета Цзяотун (номер одобрения: SCXK [Shaanxi] 2021-103). Мышей держали в течение одной недели по 5 мышей в клетке. Им был предоставлен свободный доступ к еде и воде. Перед проведением исследования животных содержали при комнатной температуре (RT; 24 °C ± 1 °C) и цикле свет/темнота (12 ч/12 ч).

1. Подготовка буфера и оборудования

1. Культура клеток C. albicans
   1. Инокулируют моноклональную колонию C. albicans (SC5314) и....

Результаты

Перенос образцов на планшетную среду и подсчет колоний после ночной инкубации обычно используется для оценки локальной патогенной нагрузки вблизи поражения^22,23. В нашем исследовании микробная культура образцов печени, почек и селезенки была отрицатель?.......

Обсуждение

Инфекция, вызванная загрязнением хирургических инструментов или операционной среды во время операции, является основной причиной большинства инфекций имплантатов 24,25,26,27. Таким образом, в данном исследовании была п.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.5 Mactutrius turbidibris	Shanghai Lujing Technology Co., Ltd	5106063
4 °C refrigerator	Electrolux (China) Electric Co., Ltd	ESE6539TA
Agar	Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd	01-023
Analytical balances	Shimadzu	ATX124
Autoclaves Sterilizer	SANYO	MLS-3750
Carbenicillin	Amresco	C0885
Eclipse Ci Nikon upright optical microscope	Nikon	Eclipse Ts2-FL
Glucose	Macklin	D823520
Inoculation ring	Thermo Scientific	251586
Isoflurane	RWD	20210103
NaCl	Xi'an Jingxi Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd	20180108
Paraformaldehyde	Beyotime Biotechnology	P0099
Peptone	Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd	01-001
RWD R550 multi-channel small animal anesthesia machine	RWD	R550
SEM	Hitachi	TM-1000
Temperature incubator	Shanghai Zhichu Instrument Co., Ltd	ZQTY-50N
Ultrapure water water generator	Heal Force	NW20VF
Ultrasound machine	Do-Chrom	DS10260D
Yeast extract	Thermo Scientific Oxoid	LP0021B