Модифицированная пункция хвостовой вены и вены полового члена для забора крови на крысиной модели

Резюме

Здесь мы представляем протокол, предлагающий быстрые, простые и надежные альтернативы сбору крови для модели крыс. Мы описываем три различных метода забора крови в зависимости от контекста: пункция хвостовой вены под наркозом или на животном, находящемся в сознании, и пункция дорсальной вены полового члена под наркозом.

Аннотация

Образцы крови требуются в большинстве экспериментальных конструкций животных для оценки различных гематологических параметров. В этой статье представлены две процедуры забора крови у крыс: пункция боковой хвостовой вены и пункция дорсальной вены полового члена, которые имеют значительные преимущества по сравнению с другими ранее описанными методами. Это исследование показывает, что эти две процедуры позволяют быстро брать пробы (менее 10 минут) и дают достаточные объемы крови для большинства анализов (202 мкл ± 67,7 мкл). Пункция дорсальной вены полового члена должна проводиться под наркозом, тогда как пункция боковой хвостовой вены может быть сделана сознательному, сдержанному животному.

Таким образом, чередование этих двух методов позволяет брать кровь в любой ситуации. Несмотря на то, что всегда рекомендуется оказывать помощь оператору во время процедуры для обеспечения благополучия животных, для этих методов требуется только один оператор, в отличие от большинства методов отбора проб крови, для которых требуется два. Более того, в то время как эти ранее описанные методы (например, забор крови из яремной палочки, подключичной вены) требуют обширной предварительной подготовки, чтобы избежать причинения вреда или смерти животного, пункция хвостовой вены и дорсальной вены полового члена редко приводит к летальному исходу. По всем этим причинам и в зависимости от контекста (например, для исследований, включающих самцов крыс, во время периоперационного или непосредственного послеоперационного периода, для животных с тонкими хвостовыми венами) оба метода могут использоваться поочередно для повторного забора крови.

Введение

Забор крови необходим для большинства исследований на животных, как in vivo , так и in vitro. У крыс, поскольку частота и количество забора крови могут быть значительными, полезно иметь различные альтернативы для сбора. В предыдущих исследованиях были описаны различные методы.

Наиболее часто используемыми методами являются пункция хвостовой вены и забор крови из подкожной вены. Отбор проб хвостовых жил подходит для всех штаммов крыс. При надлежащем обучении процедура проста в выполнении и причиняет животному минимальные страдания¹. Точно так же забор крови из подкожной вены, при условии, что он сдел....

протокол

Процедуры проводились на 3-месячных крысах-самцах Льюиса, каждая из которых весила 300-400 г. В общей сложности было включено 24 животных с тремя условиями пункции: 12 крысам была выполнена пункция хвостовой вены без анестезии (групповое телевидение без анестезии), а еще 12 крыс были анестезированы для проведения пункции хвостовой вены (групповое телевидение с анестезией) и пункции вены полового члена (группа PV с анестезией). Все процедуры были одобрены и соответствовали руководящим принципам Институционального комитета по уходу за животными и их использованию (IACUC). Все животные были подвергнуты эвтаназии в конце исследования (после 1 месяца наблюдения) путем пере....

Результаты

Успех определялся как забор крови, дающий не менее 100 мкл крови менее чем за 10 минут (от времени пункции до конца забора крови), а неудача определялась как забор крови, дающий менее 100 мкл крови или занимающий более 10 минут для получения необходимого объема крови. Допускается максимум 250 мк.......

Обсуждение

Пункция хвостовой вены является эффективным методом получения крови у крысы, находящейся в сознании. Однако, когда животное находится под наркозом, действие изофлурана может привести к спазмам сосудов и сделать непригодной пункцию хвостовой вены¹¹. Как показано в этом исс?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.5 mL | 28 G ½  Insulin Syringes	BD	329424	for tail vein puncture
0.5 mL | 30 G x 5/16 Insulin Syringes	BD	320468	for penile vein puncture
250 L  Microtainer blood collection tubes with K2EDTA	BD	365974
Gauze Sponges	Curity	6939
Isoflurane Auto-Flow Anesthesia Machine	E-Z Systems	EZ-190F	for penile vein puncture
Isoflurane, USP	Patterson Veterinary	1403-704-06	for penile vein puncture
Nosecone for Anesthesia	World Precision Instruments	EZ-112	for penile vein puncture
Rodent Restraint Cone	Harvard Apparatus	ST2 52-95-86	for tail vein puncture
Small Animal Heated Operating Table (Adjustable)	Peco Services Ltd	69023
Webcol Alcohol prep pads	Simply Medical	5110