Повышение надежности биобанка опухолей предстательной железы с помощью усовершенствованной техники отбора проб и гистологической характеристики

Резюме

Этот протокол описывает метод облегчения сбора образцов из образцов радикальной простатэктомии. Цель состоит в том, чтобы картировать, охарактеризовать и препарировать образцы тканей на основе анатомопатологических критериев на основе анатомопатологических критериев перед их хранением в биобанке.

Аннотация

Получение свежих и хорошо охарактеризованных образцов опухолевой ткани имеет решающее значение для проведения высококачественных «омиксных» исследований. Тем не менее, это может быть особенно сложно в контексте рака предстательной железы (РПЖ) из-за уникальной природы этого органа и высокой гетерогенности, связанной с этой опухолью. С другой стороны, гистопатологическая характеристика образцов перед их хранением, не вызывающая существенных изменений в тканях, также представляет собой интригующую задачу. В этом контексте мы представляем новый метод получения, картирования, характеристики и микродиссекции резецированной ткани предстательной железы на основе анатомопатологических критериев.

В отличие от ранее опубликованных протоколов, этот метод сокращает время, необходимое для гистопатологического анализа образца предстательной железы без нарушения его структуры, что имеет решающее значение для оценки хирургических краев. Кроме того, он позволяет проводить разграничение и микромакродисперсию свежих образцов ткани предстательной железы, уделяя особое внимание гистологическим областям опухолей, определяемым патологическими критериями, такими как шкала Глисона, предшествующие поражения (интраэпителиальная неоплазия предстательной железы высокой степени злокачественности - PIN) и воспалительные поражения (простатит). Затем эти образцы хранятся в биобанке для последующих исследовательских анализов.

Введение

Рак предстательной железы (РПЖ) является^2-м по частоте онкологическим заболеванием у мужчин и^5-м по значимости причиной смерти во всем мире¹. Лечение пациента и прогноз зависят от стадии и классификации опухоли (по шкале Глисона), о чем свидетельствует более высокая 5-летняя выживаемость локализованных и низкодифференцированных опухолей (6-я степень по шкале Глисона) (99%) по сравнению с высокими степенями по шкале Глисона и метастатическими опухолями (31%)².

Локальный рецидив РПЖ и неудача лечения были связаны с характерной высокой генетической внутриопухолевой гетероген....

протокол

Этот метод был разработан в результате совместных усилий различных клинических служб (урологии, патологии и биобанка больницы La Fe). Исследование было проведено в соответствии с институциональными, национальными и международными рекомендациями по благополучию человека и получило одобрение Комитета по этике биомедицинских исследований при Институте исследований санитарной больницы Университета и Политечки La Fe (Валенсия, Испания). Все образцы хранились в биобанке больницы Ла Фе (PT13/0010/0026). Общая процедура подробно описана на рисунке 1.

Результаты

Результаты показывают, что данная методика позволила получить опухолевый материал в 61% изученных случаев (25 из 41 случая) (табл. 1).

Таблица 1: Гистопатологические данные исследуемых образцов. Резюме гистопатологических данных по образцам, использованным .......

Обсуждение

В любом научном исследовании получение качественных образцов является важным требованием для уменьшения систематических погрешностей и получения надежных результатов²². Таким образом, контроль преаналитических переменных, таких как температура, при которой образцы обр?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Cadiere forceps	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471049. 18 uses.
Conventional slides	Knittel Glass	2021	Ground/ Frosted end
Cryostat microtome	Thermo Fisher Scientific	---	Criostato CryoStar NX50
Cryotubes	Greiner Bio-One GmbH	Ref.: 122280.	CRYO S. PP, with screw cap, sterile.
Da Vinci surgical system	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	XI model
Dissection instruments	Bayer	---	Two tweezers and a surgical blade
DPX Eukitt	Medizin- und Labortechnik GmbH	6.00.01.0001.06.01.01
Eosin	Agilent	157252
Fenestrated bipolar forceps	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471205. 14 lives.
Force bipolar	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471405. 12 uses.
Freezers	Thermo Scientific		MODEL 907. -80 ºC
Hematoxylin	Agilent	157251
Inmunohistochemistry Slides	Agilent-Dako	K802021-2
Large needle driver	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471006. 15 uses.
Maryland bipolar forceps	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471172. 14 uses.
Microscope	Olympus	---	Olympus cx40
Microtome blades	PFM Medical	a35
Monopolar curved scissors	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 470179. 10 uses.
OCT compound	NEG-50	LOT.117340
PlusSpeed S Single-use Biopsy Device with beveled tip	Peter Pflugbeil GmbH	PSS-1825-S
ProGasp forceps	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471093. 18 uses.
Sample holder Disc	Davidson Cryo Chuck. BradleyProducts		30 mm
Tissue ink	Pelikan	2021	Ink 4001 brilliant black (301168)
Xylol	Quimipur	Ref. 169