Забор крови из подключичных вен у крыс в сознании

Резюме

Здесь мы представляем комбинацию эффективных методов рестрикции крыс и подключичной пункции вен, которые позволяют быстро, безопасно и многократно собирать кровь у крыс без анестезии.

Аннотация

Существует несколько общепринятых методов получения повторных образцов крови крыс, наиболее часто используемыми методами являются забор боковых вен хвоста без анестезии и забор яремной вены с анестезией. Однако большинство из этих методов требуют помощи и анестезиологического оборудования, а иногда создают трудности с точки зрения забора крови или низкого качества образцов крови. Кроме того, эти способы забора крови отнимают значительное время и человеческие ресурсы, когда требуется повторный забор крови для большого количества крыс. В этом исследовании представлена методика повторного забора крови у крыс без анестезии одним опытным человеком. Высокоудовлетворительные образцы крови можно получить путем пункции подключичной вены. Метод продемонстрировал впечатляющий общий показатель успеха в 95%, при этом среднее время от фиксации крысы до завершения забора крови составило всего 2 минуты. Кроме того, последовательный забор крови в пределах установленного диапазона не причиняет крысам никакого вреда. Этот метод стоит продвигать для забора крови, особенно в крупномасштабных фармакокинетических исследованиях.

Введение

Крысы являются одними из самых распространенных экспериментальных животных, и существует множество способов получения образцов крови. Для экспериментов, предполагающих однократный забор крови на заключительном этапе, достаточное количество крови может быть получено путем пункции сердца или забора крови из брюшной аорты¹. Тем не менее, некоторые исследования требуют повторного забора крови у крыс для рутинного анализа крови или биохимического анализа, особенно в фармакокинетических и токсикологических исследованиях, где повторный забор крови требуется для определения абсорбции, распределения и метаболизма^{лекарственных средств}

протокол

Данное исследование проводилось в соответствии с руководящими принципами, изложенными в 8-м издании Руководства по уходу за лабораторными животными и их использованию¹³. Исследование получило одобрение Комитета по этике Второй больницы Ланьчжоуского университета и было задокументировано в соответствии с руководящими принципами ARRIVAL 2.0¹⁴. Двенадцать здоровых крыс линии Вистар (шесть самцов весом 290-330 г и шесть самок весом 250-280 г) в возрасте 12-16 недель были помещены в лабораторию животных GLP Университета Ланьчжоу в течение 3 дней до фактического эксперимента. Использовались клетки для крыс типа R5 размером 545....

Результаты

Высококачественные образцы плазмы имеют бледно-желтый оттенок, чистоту и прозрачность, лишенные какого-либо красного оттенка или сгущения, как показано на рисунке 2A. На рисунке 2В показан гемолиз (левая сторона) или коагуляция (правая сторона) в результа?.......

Обсуждение

Несмотря на то, что забор крови из хвостовой вены является наиболее распространенным методом повторного забора крови у крыс, на него могут влиять анестезирующие препараты, а из-за небольшого размера хвостовой вены количество крови, которое может быть собрано за один раз, ограничено, чт?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.75% normal saline	Gansu Fuzheng Pharmaceutical Technology Co., Ltd.	——	Prepared heparin sodium solution
1 mL Pasteur pipette	Biosharp	BS-XG-01-NS	Blood collection
1 mL syringe (26 G, 0.45 mm x 12 mm)	Shinva Medical Instrument Co.,Ltd.	0.45*12RWLB	Blood collection
1.5 mL Eppendorf tube	Biosharp	BS-15-M	Blood storage and collection
75% medical alcohol	Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.	——	Disinfection of rat blood collection site
Centrifuge tube holder	Biosharp	BS-05/15-SM60	——
Electronic scale	Shanghai PUCHUN Measure Instrument Co., Ltd.	JE1002	Weigh
Heparin sodium injection	Hebei Changshan Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd.	——	Rinse the syringe and EP tube; dilute with normal saline to 25 U/mL
Low temperature centrifuge	HuNan Xiang Yi Centrifuge Instrument  Co., Ltd.	H1750R	Separation of serum