Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
В данной работе мы представляем протокол для создания мышиной модели интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ИКСИ) и переноса эмбрионов (ЭТ), что позволяет нам наблюдать возрастные изменения в метаболизме глюкозы, которые могут быть связаны с ИКСИ, что дает представление о его потенциальном долгосрочном влиянии на развитие человека.
Продолжительность человеческой жизни значительно длинна, в то время как мышиные модели могут моделировать всю продолжительность человеческой жизни за относительно короткий период, при этом один год жизни мыши примерно эквивалентен 40 человеческим годам. Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида (ИКСИ) является широко используемой вспомогательной репродуктивной технологией в клинической практике. Однако, учитывая его относительно недавнее появление около 30 лет назад, долгосрочное влияние этого метода на развитие человечества остается неясным. В этом исследовании мы разработали метод ИКСИ в сочетании с переносом эмбрионов (ЭТ) с использованием мышиной модели. Результаты показали, что нормальная сперматозоиды мышей после культивирования in vitro и последующего ИКСИ продемонстрировала уровень оплодотворения 89,57% и двухклеточный уровень 87,38%. После ET рождаемость потомства составляла примерно 42,50%. Кроме того, по мере старения мышей наблюдались колебания уровня метаболизма глюкозы, что может быть связано с применением техники ИКСИ. Эти результаты означают, что метод ИКСИ-ЭТ у мышей обеспечивает ценную платформу для оценки влияния аномалий сперматозоидов на развитие эмбриона и их долгосрочного воздействия на здоровье потомства, особенно в отношении метаболизма глюкозы. Это исследование дает важную информацию для дальнейших исследований потенциального влияния метода ИКСИ на развитие человека, подчеркивая необходимость глубокого изучения долгосрочных последствий этой технологии.
Вопросы рождаемости стали одним из основных вопросов медицины и социологии, особенно в современном обществе, где снижение коэффициента рождаемости и растущая серьезность распространенности и тяжести бесплодия приобрели видное значение. Вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ) предоставляют широкий спектр возможностей для решения этих проблем, при этом интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида (ИКСИ) обычно используется в качестве терапевтического вмешательства.
С тех пор, как в 1992 году в Палермо была достигнута первая успешная беременность с помощью интрацитоплазматическо....
Протокол ИКСИ-ЭТ, описанный ниже, соответствует руководящим принципам и был одобрен Этическим обзором животных Шанхайского института планирования семьи. Процедуры безопасности: Всегда надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты (СИЗ) при работе с химическими или биологическими материалами. Использование вытяжных шкафов: Выполняйте все процедуры, связанные с летучими химическими веществами или образованием аэрозоля, в сертифицированном вытяжном шкафу или шкафу биобезопасности. Для процедуры суперовуляции используйте самок мышей (6-8-недельный штамм B6D2F1).
1. ИКСИ у мышей
В нашей лаборатории мы достигли уровня оплодотворения 89,57% и коэффициента оплодотворения 2 клеток 87,38% с использованием ИКСИ с каудальным сперматозоидом придатка яичка у мышей. Рождаемость потомства после ЭТ составляет примерно 42,50%. Примечательно, что все показатели ?.......
В этом исследовании были интегрированы методы интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ИКСИ) и переноса эмбрионов (ЭТ) мышей, чтобы всесторонне обобщить вспомогательные репродуктивные технологии человека (ВРТ) и изучить влияние ИКСИ в сочетании с ЭТ на разви?.......
У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.
Эта работа была поддержана Планом крупных проектов Специального фонда развития для Шанхайской национальной независимой инновационной демонстрационной зоны Чжанцзян (ZJ2022-ZD-006), Проектом целевого финансирования Шанхайской муниципальной комиссии по науке и технологиям (22DX1900400), Молодежной программой Шанхайской муниципальной комиссии по здравоохранению (20204Y0276). Национальный фонд естественных наук Китая (32070849).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
1.25% avertin (2,2,2-tribromoethanol) | Nanjing Aibei | M2960 | for anesthetization |
Bacteriological Petri Dishes 35 x 10 mm style w/tight lid, crystal-grade virgin polystyrene, sterile | BD | 353001 | |
Bacteriological Petri Dishes 50 x 9 mm style w/tight lid, crystal-grade virgin polystyrene, sterile | BD | 351006 | |
Biosafety Cabinet | ESCO | class ![]() | Aseptic operations, making culture dishes, aliquoting reagents, etc. |
CO2 Incubator | Thermo | 8000DH | Embryo culture |
Dissection Microscope | Olympus | SZX16 | Use in mouse embryo transfer |
Fluorinert Fc-770 | SIGMA | F3556 | Fluorinert FC-770 is a thermally stable fully fluorinated liquid with high dielectric strength and resistivity, used as operating fluid |
handheld glucometer | Roche | AccuChek performa | Blood glucose measurement |
HTF | Merck | MR-070-D | The EmbryoMax Human Tubal Fluid (HTF) (1x), liquid designed for use with Mouse IVF is available in a 50 mL format and has been optimized and validated for Embryo Culture. |
Hydraulic Microinjector | Eppendorf | CellTram 4r Oil, 5196000030 | For sperm injection |
Inverted Microscope | Nikon | TI2-U | Micromanipulation observation host |
KSOM | Merck | MR-020P-D | (1x), Powder, w/o Phenol Red, 5 x 10 mL |
M2 | Merck | MR-015-D | EmbryoMax M2 Medium (1x), Liquid, with Phenol Red |
Micromanipulator | NARISHIGE | NTX-N4 | Micromanipulation arm |
mineral oil | SIGMA | M8410 | Mineral oil is suitable for use as a cover layer to control evaporation and cross-contamination in various molecular biology applications. |
Needle Cutter | Nanjing Aibei | Sutter MF-800 | Use for fabricating micromanipulation needles |
Needle Puller | Nanjing Aibei | Sutter model p-100 | Use for making micromanipulation needles |
Piezo Drill Trip Mouce ICSI | Eppendorf | 5195000.087 | Application of ICSI injection needle. |
Piezoelectric Micromanipulator (Membrane Breaker) | Eppendorf | Eppendorf PiezoXpert | Use of micro-pulses to break the zona pellucida and oolemma of the oocyte |
Pneumatic Microinjector | Eppendorf | CellTram 4r Air, 5196000013 | For fixing the oocyte |
Ready-to-use Human Chorionic Gonadotropin (Hcg) | Nanjing Aibei | M2520 | Sterilization reagent, intraperitoneal injection. 50 IU/mL |
Ready-to-use Pregnant Mare's Serum Gonadotropin (PMSG) | Nanjing Aibei | M2620 | Sterilization reagent, intraperitoneal injection. 50 IU/mL |
Stereomicroscope | Olympus | SZX7 | Oocyte retrieval and observation of embryo development |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеСмотреть дополнительные статьи
This article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены