Хроническое констрикционное повреждение дистального инфраорбитального нерва (DIoN-CCI) у мышей для изучения нейропатической боли тройничного нерва

Резюме

Хроническое сужительное повреждение дистального инфраорбитального нерва у мышей вызывает изменения спонтанного поведения (повышенная активность по уходу за лицом) и ноцифенсивного поведения в ответ на тактильную стимуляцию (гиперреактивность на стимуляцию волос фон Фрея), которые являются признаками продолжающейся боли и аллодинии, и служит моделью нейропатической боли тройничного нерва.

Аннотация

Животные модели остаются необходимыми инструментами для изучения нейропатической боли. В данной рукописи описана модель хронического констрикционного повреждения дистального инфраорбитального нерва (DIoN-CCI) для изучения нейропатической боли тройничного нерва у мышей. Это включает в себя хирургические процедуры для выполнения хронической констрикционной травмы и послеоперационные поведенческие тесты для оценки изменений в спонтанном и вызванном поведении, которые являются признаками продолжающейся боли и механической аллодинии. Методы и поведенческие показания аналогичны модели хронического повреждения инфраорбитального нерва (IoN-CCI) у крыс. Тем не менее, необходимы важные изменения для адаптации модели IoN-CCI к мышам. Во-первых, интраорбитальный доступ заменяется более ростральным доступом с разрезом между глазом и подушечкой усов. Таким образом, IoN лигируется дистально за пределами орбитальной полости. Во-вторых, из-за более высокой локомоторной активности у мышей, позволить крысам свободно передвигаться в небольших клетках заменяется помещением мышей в специально разработанные и изготовленные ограничивающие устройства. После лигирования DIoN у мышей наблюдаются изменения в спонтанном поведении и в ответ на стимуляцию волос фон Фрея, которые аналогичны таковым у крыс с IoN-CCI, т.е. повышенный направленный уход за лицом и гиперреакция на стимуляцию волос фон Фрея на территории IoN.

Введение

Нейропатическая боль возникает из-за повреждения соматосенсорной нервной системы, что приводит к аномальной передаче сенсорных сигналов в мозг. Повреждение соматосенсорных нервов не всегда приводит к нейропатической боли, но распространенность увеличивается с тяжестью клинической нейропатии ^1,2. Пациенты с нейропатической болью испытывают специфические симптомы, такие как спонтанные ощущения (жжение, покалывание, электрические ощущения) и аномально интенсивную или длительную боль при безобидной или вредной стимуляции, которая имеет тенденцию становиться хронической и устойчиво....

протокол

Лечение и уход за животными осуществляются в соответствии с рекомендациями по исследованию боли у животных, находящихся в сознании, Международной ассоциации по изучению боли и в соответствии с Фламандскими и Европейскими правилами исследований на животных и рекомендациями ARRIVE. Протокол утверждается институциональным Этическим комитетом.

1. Животные

1. Используйте самцов и самок мышей C57BL/6J (Жанвье, 10 недель на момент прибытия).
2. Содержать самцов и самок мышей отдельно в стандартных клетках с твердым дном в помещении колонии с влажностью 40%-60% и комнатной температуро....

Результаты

Мыши DIoN-CCI демонстрируют значительное послеоперационное увеличение времени, затрачиваемого на изолированный груминг лица, и количество эпизодов изолированного груминга лица (Рисунок 3). Самое сильное увеличение происходит в течение первой послеопер?.......

Обсуждение

У крыс ранее утверждалось, что интраорбитальный подход к IoN является предпочтительным, учитывая важность неповрежденной мелкой мускулатуры, контролирующей сложные паттерны взбивания в виброссотактильной дискриминации, и относительное расстояние разреза по средне?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Chromic catgut (6-0)	Dynek	CG602D	ligatures
Cotton applicator	Pharmacy
Digital video camera	Sony	HDR-CX330E
Dumont #5 forceps	Fine Science Tools	11251-10
Dumont forceps - Micro-blunted tips (#5/45)	Fine Science Tools	11253-25
Duratears	Alcon	0037-820	ophthalmic ointment
Hooked ligation aid	Fine Science Tools	18062-12
Ketalar	Pfizer		ketamine (50 mg/mL)
Operation microscope	Kaps	SOM 62
Precision cotton swab	Qosina	10225
Precision trimmer	Philips	HP6392/00
Rompun	Bayer		xylazine (2%)
Scissors - blunt tips	Fine Science Tools	14574-09
Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit	Stoelting	58011
Vicryl Rapide	Ethicon	MPVR489H	sutures