Экстракция гликана из нерастворимого в спирте остатка

Для начала с помощью механического TissueLyser встряхните ранее приготовленную смесь AIR CDTA с частотой 27 Гц в течение двух минут, а затем с частотой 10 Гц в течение двух часов. Далее центрифугируйте смесь при 10 000 G в течение 10 минут при четырех градусах Цельсия. Перенесите надосадочную жидкость в стерильную микроцентрифужную пробирку.

Наконец, добавьте гидроксид натрия и смесь борогидрида натрия в остаточную гранулу. После встряхивания и центрифугирования гранул промойте остатки гранул два-три раза дистиллированной водой. Добавьте в гранулу 30 микролитров целлюлазы на миллиграмм, затем инкубируйте пробирки в тепловом блоке при оптимальной температуре фермента в течение 16 часов.

Центрифугируйте образцы и храните надосадочную жидкость на вращающемся шейкере. Снова центрифугируйте все хранящиеся экстракты при 10 000 г в течение 10 минут при четырех градусах Цельсия.