Для начала подготовьте для операции операционную платформу в комнате со скамьей размером 60 на 60 сантиметров. Очистите поверхность 70%-ным спиртом и накройте одноразовым медицинским полотенцем. Затем продезинфицируйте участок ультрафиолетовым излучением в течение 30 минут.
Акклиматизация восьминедельной самки мыши C57 black/6 в интернате на неделю перед операцией. С помощью чистой ватной палочки нанесите лосьон для удаления волос на заднюю часть мыши, находящейся под наркозом. Через три-пять минут удалите волоски с помощью марли и ватных палочек.
Далее очистите кожу 70% этанолом. Зафиксируйте мышь на операционной платформе спиной вверх с помощью резиновой полоски или хлопчатобумажной веревки и нанесите раствор йодофора для очистки спины. При овариоэктомии с помощью одноразового скальпеля сделайте дорсальный разрез шириной в один сантиметр продольно от основания бедра вверх, следя за тем, чтобы надрезы делались только на коже и подкожной фасции, и избегая разреза на задней брюшине.
Затем потяните разрез влево, чтобы визуализировать белую жировую подушку. С помощью микрощипцов и ножниц разрежьте по 0,5 сантиметра вдоль белого жирового подушечки, чтобы обнажить внутрибрюшинную полость. После разреза задней брюшины с помощью микрощипцов медленно и аккуратно удалите белый жировой пакетик из внутрибрюшинной полости.
Сразу после удаления смочите белую жировую ткань стерильной марлей, пропитанной физиологическим раствором на 0,9%. В нижней части белого жирового пакета определите розовые гранулированные вещества как яичники и убедитесь, что они соединены с маткой. С помощью рассасывающихся швов 5O перевязать яичниковый конец матки.
Затем удалите левый яичник, избегая прямого контакта хирургических инструментов с яичниками, предотвращая внутрибрюшинную имплантацию ткани яичника. После операции осторожно поместите белый жировой пакетик обратно во внутрибрюшинную полость. Затем, используя рассасывающийся шов 5-0, выполните прерывистый шов на задней брюшине.
Очистите любые участки кровотечения марлей, смоченной в 0,9% стерильном физрастворе. Далее потяните разрез кожи вправо и удалите правый яичник тем же методом. Наложите прерывистые швы 4-0 нерассасывающимися нитями и очистите кровотечение 0,9% стерильной марлей, пропитанной физиологическим раствором.
После наложения обоих швов очистите рану раствором йодофора. Через 24 часа введите мелоксикам подкожно для облегчения боли. Ежедневно наблюдайте за мышью, чтобы убедиться в правильном заживлении хирургических ран без каких-либо признаков осложнений.
Через три дня накормите мышь свежеприготовленным эстрадиола валератом. Для введения ФСГ готовят раствор ФСГ путем растворения рекомбинантного порошка человеческого ФСГ в 0,9% стерильном физрастворе до 100 международных единиц на миллилитр. В зависимости от биологической активности рекомбинантного ФСГ вводят растворитель или различные дозы рекомбинантного ФСГ путем внутрибрюшинного введения в течение двух недель.
Мазковые изображения клеток, окрашенных Папаниколау, четко определили стадии проэструса, течки, метеструса и диэструса цикла эструса. Напротив, у мышей с двусторонней овариоэктомией отверглась цикл течки. Метод ELIZA показал достоверное снижение уровня эстрадиола в сыворотке крови у мышей с двусторонней овариоэктомией по сравнению с мышами фиктивной группы.
Эндогенный эстроген, синтезируемый в экстрагонадной ткани, не влияет на стабильность уровней эстрогена в мышиной модели, получавшей ФСГ.
