Для начала взвесьте три грамма порошка родиолы кренулата и переложите его в 100-миллилитровую коническую бутылку. С помощью пипетки с большой миской добавьте в бутылку 25 миллилитров метанола. Поместите флакон в ультразвуковой прибор.
Установите мощность на 250 Вт, частоту на 40 килогерц, время на 30 минут и запустите ультразвуковое исследование. Далее промойте бутылку снаружи под проточной водой до тех пор, пока она не достигнет комнатной температуры. Отфильтруйте раствор через микропористую мембрану толщиной 0,22 микрона.
С помощью одномиллилитрового шприца отасуньте 800 микролитров жидкости из бутылки и соберите 400 микролитров промежуточного раствора в хроматографический флакон для образцов. Отмерьте и добавьте один миллиграмм салидрозида, 0,5 миллиграмм тирозола и 0,5 миллиграмма галловой кислоты в три отдельных одномиллилитровых мерных колбы. Затем наполните каждую колбу до масштаба, отмеченного метанолом.
Ультразвуковую обработку образцов в ультразвуковом приборе можно использовать в условиях, описанных ранее. После ультразвукового исследования отсасывайте 800 микролитров жидкости из колбы. Отфильтруйте раствор через микропористую мембрану толщиной 0,22 микрометра и соберите 400 микролитров фильтрата во флакон.
Добавьте трихлорметан, этилацетат, метанол и муравьиную кислоту с одной стороны цилиндра для хроматографии в двойном баке. Встряхните цилиндр, чтобы равномерно перемешать содержимое и накрыть верхнюю головку блока цилиндров. Разложите стандартные растворы галловой кислоты, салидрозида, тирозола и наш раствор кренулата на штативе для образцов в положениях от А1 до А4. Положите на стол для отбора проб силиконовый лист размером 5х10 сантиметров.
Включите автоматическую машину для отбора проб и откройте клапан управления воздухом. Нажмите кнопку «Продолжить» для автоматического отбора проб. После отбора проб выключите машину и воздушный клапан.
Снимите силиконовый лист с машинки. Поместите силиконовый лист в другую сторону цилиндра для хроматографии с двойным баком. Накройте верхнюю головку блока цилиндров крышкой и предварительно пропитайте в течение 20 минут.
Затем с помощью пинцета удерживайте верхний конец пластины тонкого слоя и быстро поместите силиконовый лист в проявку. Как только органический растворитель испарится, опрыскайте силиконовый лист хромогенным раствором. Тонкослойный хроматографический анализ показал, что в образце R.crenulata появились пятна того же цвета, соответствующие нормам галловой кислоты, салидрозида и тирозола.