Для начала включите массовый фотометр и дайте ему поработать в течение часа, прежде чем начинать какие-либо измерения. Включите питание и нажмите кнопку изоляции, чтобы активировать антивибрационный стол. Впоследствии включите воздушный компрессор, чтобы активировать блок MicrofluidX.
Затем запустите программное обеспечение для сбора данных, а затем управляющее программное обеспечение MicrofluidX. Чтобы загрузить образец и кальбирант, поместите центрифужную пробирку кальбиранта в слот номер четыре, а пробирку центрифуги для образца — в слот номер пять в блоке MicrofluidX. Поместите чистящие растворы CS1, CS2 и CS3 в первый, второй и третий положения соответственно в коробке MicrofluidX.
Прикрепите крышку, которая соединяет буферную линию, к 200-миллилитровому буферному флакону с pH 7,4. Затем установите чип MicrofluidX на подготовительную пластину. Подсоедините другой конец трубки датчика расхода S к входному отверстию первого канала на микросхеме MicrofluidX, завершая линию отбора проб.
Вставьте другой конец датчика расхода L в буферное входное отверстие первого канала на микросхеме MicrofluidX, завершая буферную линию. Для сбора оттока подсоедините трубку к выходному отверстию первого канала на микросхеме MicrofluidX, а другой конец поместите в контейнер для отходов, колбу или стакан. Нанесите небольшое количество иммерсионного масла микроскопа на линзу объектива массового фотометра.
Расположите микросхему MicrofluidX на держателе массового фотометра так, чтобы входное отверстие для образца было обращено вверх, и закрепите его с помощью зажимов для предметного стекла. Используйте программное обеспечение для сбора данных для регулировки предметного столика, совмещая зону наблюдения первого канала с объективом фотометра. Затем закройте крышку масс-фотометра и активируйте функцию поиска фокуса для разведения капель в программном обеспечении для сбора данных.
Осмотрите белое кольцо фокусировки в левом нижнем углу интерфейса программного обеспечения. Если в иммерсионном масле присутствуют зазоры, указывающие на пузырьки воздуха, увеличьте скорость сцены до максимальной и аккуратно перекладывайте сцену из стороны в сторону, чтобы устранить их. Нажмите кнопку записи, чтобы начать измерение в течение одной минуты, убедившись, что во время измерения нет примесей.
Снимите крышку с буферной бутылки объемом 200 миллилитров с pH 7,4 и прикрепите ее к буферной бутылке объемом 200 миллилитров с pH 5,0. Поместите микросхему MicrofluidX на подготовительную пластину, как показано ранее, и используйте второй канал на микросхеме MicrofluidX вместо первого для сбора оттока. В управляющем программном обеспечении MicrofluidX установите переключатель M в положение пять.
Установите расход пробоотборной линии на восемь микролитров в минуту и убедитесь, что давление в пробоотборной линии остается ниже 350 миллибар. При расчете скоростей потока сопоставьте полную разницу низких скоростей с желаемым коэффициентом разбавления пробы. После завершения эксперимента следуйте протоколу очистки, чтобы поддерживать чистоту линий.
