Для начала перенесите одну мышь из корпуса в испытательную комнату в закрытой пластиковой клетке без подстилочного материала. Поставьте клетку перед видеокамерой. Затем поместите зеркало, чтобы видеть лицо мыши, когда она обращена спиной к камере.
Записывайте поведение мыши в течение 10 минут. После записи очистите клетку для наблюдения перед записью следующего животного. Пусть наблюдатель будет слеп к условиям эксперимента, чтобы проанализировать записанное поведение мыши.
Обратите внимание на каждый эпизод груминга лица в течение 10-минутной записи. Проводите различие между изолированным уходом за лицом и поведением по уходу за лицом во время ухода за телом. Определите количество эпизодов груминга лица с помощью четырехсекундного порогового критерия.
Время между действиями груминга менее четырех секунд определяется как пауза в одном эпизоде. Время, превышающее четыре секунды, определяется как полное прерывание действий по грумингу между двумя эпизодами. Поместите хвост мыши в мягкий силиконовый зажим и прикрепите зажим с помощью магнита к металлической пластине на столе.
Наденьте на мышь пластиковый держатель с тремя стенками так, чтобы из контейнера выступала только голова. Поместите груз на верхнюю часть держателя, чтобы он оставался на месте. Используйте градуированную серию из четырех волосков фон Фрея, чтобы приложить силу к мыши.
Приучайте мышку к удерживающему устройству и достаточным движением в течение 10 минут. Когда мышь расслабится, медленно нанесите самые светлые волосы фон Фрея в область подглазничного нерва рядом с центром вибрисс, пока они не согнутся. Оцените реакцию мыши на стимуляцию по одной из следующих категорий.
Рассчитайте средний балл для ипсилатеральных ответов на четыре волоса фон Фрея, затем рассчитайте средние баллы для контралатеральных сторон. У мышей с хроническим повреждением дистального инфраорбитального нерва наблюдалось значительное послеоперационное увеличение времени и эпизодов изолированного ухода за лицом, достигая пика в первую неделю, а затем постепенно снижаясь, оставаясь повышенным в течение шести недель. Первоначально мыши с хронической констрикцией дистального инфраорбитального нерва показали почти полную невосприимчивость к механической стимуляции, которая в течение последующих недель трансформировалась в гиперреакцию продолжительностью в течение шести недель.
Также наблюдалось незначительное повышение реакции на контралатеральную механическую стимуляцию.
