Для начала разморозьте флаконы с вирусным вектором на льду в течение 20 минут и разведите частицы AAV в 100 микролитрах DPBS. Загрузите разведенный раствор AAV в одномиллилилитровый шприц с помощью иглы 28-30 калибра, избегая образования пузырьков воздуха. Закрепите мышь под наркозом в ограничителе подсветки хвоста.
И с помощью марлевой салфетки прочистите место укола антисептиком. Массируйте хвост двумя пальцами до тех пор, пока не будет замечена вена. Затем введите вектор в хвостовую вену под небольшим углом, и извлеките иглу.
С помощью пальца немедленно надавите на место инъекции, чтобы остановить кровотечение. Чтобы приготовить полоксамер 407, растворите его в DPBS на ротаторе на ночь при температуре четыре градуса Цельсия в шкафу биобезопасности. Далее удерживаем мышь вручную под вытяжным шкафом, располагая ее голову и корпус вниз.
С помощью антисептика очистите место инъекции в левом-нижнем квадранте брюшной полости латерально к средней линии. Чтобы ввести P407, введите иглу в брюшную полость под углом 45 градусов или менее. После четырех недель индукции гиперлипидемии эхокардиография выявила сердечную недостаточность с сохранением фракции выброса, так как время внутрижелудочковой релаксации было увеличено.
Наблюдалось повышенное соотношение между скоростью раннего митрального мышечного потока и ранней диастолической скоростью митрального кольца, наряду со снижением ранней и поздней диастолической скорости трансмитрального потока.