После препарирования левой передней нисходящей коронарной артерии и экстубации мыши, находящейся под наркозом, вставьте вертикальную боковую часть и прорези на опорной пластине специального инструмента для лечения ишемической и реперфузионной травмы. С помощью тонкого крючка извлеките два конца швов и протяните их через центральное отверстие в боковой части позади баллона. Проведите один конец шва над и вокруг баллона, а затем проведите противоположным концом под и вокруг баллона.
Направьте концы шва через прорези сверху на боковой части. На дистальную часть шовной нити приложите груз весом 2,1 грамма, чтобы удерживать каждый конец шва на месте. Чтобы вызвать ишемию, быстро надуйте баллон с помощью насоса сосудистого баллона до двух делений.
После блокировки насоса подтвердите надувание баллона и убедитесь, что грузы подняты. Подтвердите ишемию, наблюдая за изменением следа ЭКГ. Через 30 минут разблокируйте помпу, чтобы остановить окклюзию.
Убедитесь, что баллон спущен и грузы опущены. Разрежьте шов и трубку между мышью и боковой частью, затем аккуратно снимите боковую часть. Нанесите гель со стороны введения трубки в грудную клетку.
С помощью изогнутых щипцов аккуратно прижмите кожу к трубке, а другим щипцом извлеките трубку. Разрежьте остатки швов близко к коже. Наложите дополнительный полипропиленовый шов 5-0, чтобы герметизировать выходную сторону трубки и свести к минимуму риск попадания воздуха в грудную клетку.
В данном исследовании изучалась жизнеспособность миокарда после ишемии-реперфузионного повреждения. Окрашивание трифенилтетразолия хлоридом дифференцировано жизнеспособных и нежизнеспособных областей миокарда у мышей. Существенных различий между стандартной и дистанционной методиками ишемии-реперфузионного повреждения не наблюдалось.
Магнитно-резонансная томография с поздним усилением гадолиния не выявила заметных различий в зоне риска между стандартными и дистанционными методами ишемии-реперфузионного повреждения. Окрашивание в красный цвет сириуса отличало некротическое ядро от жизнеспособной ткани. Рассчитанные размеры рубцов не выявили заметных различий в зоне риска между двумя методами ишемии-реперфузионного повреждения.
С помощью специально разработанного инструмента для удаленной окклюзии в МРТ-сканере наблюдались различия в контрасте между неинфарктными и инфарктными областями. Исследования ЭКГ до и после окклюзии подтвердили успешную окклюзию левой передней нисходящей коронарной артерии.
