Протокол прямого посева посева (DIP) для идентификации бактерий с использованием автоматизированной системы идентификации микроорганизмов и тестирования чувствительности к противомикробным препаратам (aMIAST)

Для начала возьмите мазок из перегородки автоматизированной бутылки для посева крови, содержащей мономорфные грамотрицательные организмы с 70% изопропиловым спиртом внутри шкафа биобезопасности класса 2А. Наберите пять миллилитров смеси кровяного бульона в стерильный шприц, оснащенный иглой 21 калибра. Далее продезинфицируйте резиновую перегородку резиновой сепараторной трубки.

Переложите кровяную бульонную смесь в пробирку. Центрифугируйте образец при 160 G в течение 10 минут. Теперь осторожно выведите надосадочную жидкость внутри шкафа биобезопасности.

Переложите надосадочную жидкость в новую простую пробирку для сбора крови. Поместите закрытый флакон в центрифугу при температуре 2000 G на 10 минут. Теперь аспирируйте надосадочную жидкость с помощью стерильной пипетки.

Затем раздайте три миллилитра стерильного физиологического раствора в пробирку aMIAST с помощью флакона-дозатора. Используя стерильный контур инокуляции, возьмите бактериальную гранулу со дна флакона и введите ее в пробирку aMIAST. Используйте стерильный физиологический раствор и денситометр для регулировки мутности суспензии в диапазоне от 0,47 до 0,63.

Затем поместите в первую пробирку капиллярное крепление грамотрицательной идентификационной карты aMIAST. Расположите выбранные карты на кассете соответствующим образом. Теперь загрузите кассету на место в камере розлива штрих-кодом образца внутрь.

Закройте дверцу и нажмите кнопку «Заполнить» на экране пользовательского интерфейса. Когда цикл заправки будет завершен, синий индикатор на системе начнет мигать. Теперь перенесите кассету из камеры наполнения в камеру загрузки.

Уберите отходы кассеты после завершения загрузки. Субкультуру оставшейся в пробирках суспензии на CLED агаре для проверки чистоты изолятов. Результаты семи флаконов с положительным результатом исследования крови, выявленных с использованием протокола прямого посева инокулята, были противоречивыми вплоть до видового уровня.

Из 105 грамотрицательных негативов, идентифицированных по стандартному протоколу инокулята, 98 были правильно идентифицированы по протоколу прямого посева. Среди 99 грамотрицательных сосудов, не относящихся к RAST, в четырех флаконах с положительным посевом крови был идентифицирован грамотрицательный негатив, о котором сообщается по RAST.