Установление и оценка развития биопленки Pellicle в культурах Mycobacterium smegmatis

Для начала в ламинарном колпаке нанесите шесть миллилитров среды Саутана с добавлением 2% глюкозы в лунки шестилуночного планшета. Инокулируйте лунки 120 микролитрами вторичных культур Mycobacterium smegmatis. Держите один непривитый в качестве средства контроля среды.

Далее пипеткой вверх и вниз пипеткой вверх и вниз с помощью микропипетки объемом 1 миллилитр для равномерного перемешивания. Накрываем крышкой и тщательно заклеиваем тарелку парафиновой пленкой. Инкубируйте планшет в статическом инкубаторе при температуре 37 градусов Цельсия в течение семи дней.

Для визуальной оценки роста биопленки поместите пластины в систему документирования геля под эпи-освещением белым светом. Чтобы измерить сухой вес, взвесьте лист промокательной бумаги. Извлеките биопленку из шестилуночного планшета и перенесите ее на бумагу с помощью шпателя.

Тщательно соберите большую часть биопленки с культуры. Поместите биопленку на промокательную бумагу. Поместите промокательную бумагу в инкубатор до полного высыхания биопленки.

Затем измерьте общий вес бумаги и биопленки. Биопленочные пленки были видны с 3-го дня и далее. Сетчатость культур улучшалась при добавлении 2% глюкозы в среду Саутана.

Развитие биопленки было заметно между 3 и 6 днями. На 3-е сутки наблюдалась пленка с незначительной сетчатостью. Этот фильм повзрослел к 5-му дню и распался с 6-го дня.