QDNB-антитела конъюгирует препарат с использованием метода одноступенчатого эмульсионного выпаривания

Для начала добавьте 100 микролитров подготовленных наногранул QD в 200 микролитров фосфатного буфера. Затем добавьте шесть микролитров EDC. После этого выдержать смесь в течение 30 минут при комнатной температуре на ротационном миксере.

Центрифугируйте смесь при 13, 523 г в течение 10 минут при комнатной температуре и выбросьте надосадочную жидкость. Далее добавьте в осадок 100 микролитров фосфатного буфера. Накройте трубку крышкой и погрузите ее в действующую ультразвуковую водяную баню до полного рассеивания осадка.

Диспергируйте 100 мкг антитела в 200 микролитрах фосфатного буфера, и добавьте активированную суспензию наногранул QD в раствор антитела. Инкубируйте смесь при комнатной температуре в течение 30 минут при непрерывном вращении. Затем излишки антител удаляют центрифугированием при 6, 010 г в течение пяти минут при комнатной температуре, и осторожно выбрасывают надосадочную жидкость.

Чтобы заблокировать наногранулы, добавьте в остаток 200 микролитров 1%-ного раствора казеина. Накройте трубку крышкой и погрузите ее в рабочую ультразвуковую водяную баню до полного рассеивания остатков. Инкубируйте смесь при комнатной температуре в течение двух часов при непрерывном вращении.

Добавьте в смесь 100 микролитров консервирующего раствора и храните при температуре четыре градуса Цельсия для последующего использования.