Для начала наденьте соответствующие средства индивидуальной защиты. Перед процедурой взвесьте крысу, чтобы определить правильную дозу для лекарств, зависящих от веса, и настройки аппарата искусственной вентиляции легких. После обезболивания крысы поместите ее в положение лежа.
Чтобы подтвердить глубину анестезии, с помощью щипцов аккуратно надавите на подушечку лапы задней конечности и проверьте отсутствие реакции отмены. Теперь нанесите на глаза крысы одобренную ветеринаром мазь на нефтяной основе, чтобы предотвратить сухость. Наблюдайте за частотой дыхания и оценивайте реакцию отмены, как показано ранее.
Затем с помощью машинок для стрижки побрейте заднюю конечность крысы. С помощью клейкой ленты расположите конечность так, чтобы лодыжка была зафиксирована под углом 90 градусов тыльного сгибания, колено было разгибаемо, а бедро отводилось. После этого введите пару изолированных монополярных игл 28 калибра для стимуляции седалищного нерва с катодом, расположенным в области проксимального отдела задней конечности, и анодом, расположенным более проксимально внутри подкожной клетчатки, над крестцом.
Затем поместите одноразовый заземляющий электрод на контралатеральную заднюю конечность или хвост. Осторожно вставьте автоклавный игольчатый электрод 27 калибра 25 миллиметров, специально разработанный для электромиографии одного волокна, в правую икроножную мышцу. Вставьте одноволоконный игольчатый электрод электромиографии параллельно волокнам икроножной мышцы, чтобы захватить потенциал действия одного волокна.
Применяйте стимуляцию постоянным током к правому седалищному нерву с частотой 10 Гц, используя диапазон интенсивности от 0,3 до 10 миллиампер и длительность импульса 0,1 миллисекунды. Отрегулируйте коэффициент усиления от 200 микровольт до 1000 микровольт на деление для улучшения визуализации потенциала. Настройте скорость развертки на уровне 500 микросекунд на деление.
Чтобы классифицировать отклик как SFAP, он должен демонстрировать время нарастания менее 500 микросекунд, минимальную амплитуду 200 микровольт и демонстрировать полное или отсутствующее поведение. Рассчитайте джиттер или изменчивость задержки SFAP между последовательными разрядами после не менее 50 интеграций с использованием заданного уравнения. Оценка и количественная оценка блокировок.
Оценив 10 синапсов от каждого животного, рассчитайте дрожание и определите средние значения для каждого животного. При регистрации потенциалов, которые демонстрируют прерывистую блокировку, увеличьте интенсивность стимула, чтобы подтвердить, что неудача SFAP не связана с субмаксимальной стимуляцией. При введении рокурония ЭМГ с одним волокном показала повышенную вариабельность передачи и блокировку нервно-мышечных соединений по сравнению со здоровыми людьми.
