Препарирование инвертированных мешочков тощей кишки для демонстрации мембранного транспорта гистидина

Для начала поместите внутренности козы в PBS так, чтобы они были полностью погружены для очистки. Отделите тонкую кишку от толстой. С помощью ножниц удалите наружную соединительную ткань.

Аккуратно промойте тонкую кишку с помощью PBS с помощью 10-миллилитрового шприца, чтобы удалить непереваренный пищевой материал и получить полый мешок тонкой кишки. С помощью линейки измерьте полную длину тонкой кишки. Разделите кишечник на три части: двенадцатиперстную кишку и оставшуюся часть поровну на тощую и подвздошную кишку.

С помощью лезвия удалите всю соединительную ткань, чтобы очистить тощую кишку. Разрежьте тощую кишку на части длиной от 12 до 15 сантиметров. После промывки порций PBS поместите их в чашку Петри, содержащую PBS.

С помощью стеклянного стержня переверните части тощей кишки, чтобы обнажить ворсинки снаружи. Аккуратно промойте втянутые части тощей кишки PBS. Проверьте наличие утечек с боков перевернутой тощей кишки.

Затем разрежьте перевернутые части тощей кишки на пятисантиметровые мешочки. Завяжите по одному концу каждого мешочка шпагатом. Заполните мешочки PBS, чтобы повторно проверить их на наличие визуальных утечек.

Завяжите другой конец мешочков, чтобы создать пустые перевернутые мешочки с ворсинками на внешней поверхности. Похлопайте перевернутый мешок по фильтровальной бумаге, чтобы еще раз проверить на наличие внешних утечек.