Для начала поместите разбавленные 60% растворители для микроволновой экстракции на рабочую платформу. Взвесьте 0,67 грамма кофе с серебристой кожурой и смешайте с 20 миллилитрами экстракционного растворителя в соотношении один к 30 в реакционной емкости. Добавьте в сосуд магнитную мешалку, чтобы обеспечить равномерное распределение тепла и растворителя в образце.
Плотно закройте сосуд с помощью специального инструмента и поместите его в камеру экстракции с помощью микроволновой печи. Чтобы настроить метод, нажмите на значок панели инструментов на верхней панели монитора и выберите ротор SK eT в разделе аксессуаров. Затем нажмите на перемешивание и введите 20%, чтобы установить скорость перемешивания.
Нажмите на сектор дверного замка и настройте его на активацию при температуре, превышающей 80 градусов по Цельсию. Затем нажмите на значок таблицы на верхней панели и установите температурный градиент T1 на продолжительность экстракции 10 минут. Мощность микроволновой печи до 1800 Вт и температура до 120 градусов по Цельсию.
Чтобы активировать перемешивание, нажмите на кнопку перемешивания и дождитесь, пока не загорится зеленый свет. Установите скорость вентилятора нагнетателя на уровень три. Чтобы удержать время экстракции, выберите желаемую температуру экстракции T2, установив продолжительность экстракции на 15 минут, мощность микроволновой печи на 1800 Вт и температуру на 120 градусов Цельсия.
Теперь нажмите на кнопку охлаждения в левом нижнем углу экрана и выберите время охлаждения 10 минут. Нажмите на значок «Сохранить» в правом верхнем углу экрана. Начните процесс экстракции, выбрав количество используемых сосудов.
После экстракции центрифуга извлекает при температуре 9072 г в течение 15 минут при четырех градусах Цельсия. Соберите надосадочную жидкость стеклянной пипеткой объемом 10 миллилитров и храните при температуре минус 20 градусов Цельсия. Разбавьте экстракты серебристой кожуры кофе в десять раз с дистиллированной водой в 96-луночной тарелке.
Смешайте 10 микролитров разведенного образца с 20 микролитрами неразбавленного реактива фолин-чокальтеу, и дайте им вступить в реакцию в течение трех минут. Далее добавьте 100 микролитров 7,5%-ного раствора карбоната натрия в смесь в каждую лунку 96-луночной пластины. Приготовьте различные концентрации для стандартного диапазона концентраций галловой кислоты, разбавив дистиллированной водой.
Смешайте их с 20 микролитрами реагента folin-ciocalteu и дайте им вступить в реакцию в течение трех минут. Далее добавьте 100 микролитров 7,5%-ного раствора карбоната натрия в смесь в каждую лунку 96-луночной пластины. Инкубируйте реакцию в течение 30 минут в темноте при комнатной температуре.
На считывателе микропланшетов измерьте поглощение реакционной смеси на 765 нанометрах. Постройте стандартную калибровочную кривую с использованием концентраций стандарта и поглощения на уровне 765 нанометров. Выразите результаты в миллиграммах эквивалента галловой кислоты на грамм образца.
Экстракция гександиола в воде 1, 2 дала самое высокое общее содержание фенола, а водная экстракция дала самое низкое. Экстракция гександиола в воде 1, 2 давала наибольшее общее содержание флавоноидов, а экстракция водным изопентилдиолом давала наименьшее значение. Водная экстракция гексиленгликолем показала самое высокое значение DPPH, а экстракция водным этанолом показала самое низкое.
Экстракция водного пентиленгликоля привела к наивысшему значению ABTS-анализа, а водная экстракция — к самому низкому. Водная экстракция гексиленгликолем показала самое высокое значение FRAP, а водная экстракция показала самое низкое.
