Для начала включите систему перфузии тканей in vitro. Отрегулируйте температуру ванны прибора до 37 градусов Цельсия. Затем поместите в ванну физиологический раствор соли с температурой 37 градусов Цельсия, или PSS.
Подготовьте хирургический шов диаметром 15 сантиметров и пропитайте его четырьмя градусами Цельсия PSS, насыщенным 95% кислорода и 5% углекислым газом. Зафиксируйте один конец кишечного канала швом, а другой конец закрепите с помощью стального игольчатого крючка. Далее установите кишечную трубку.
Закрепите сегмент со стальным игольчатым крючком на дне ванны, а другой конец хирургической линии прикрепите к датчику. Включите газовый выключатель, чтобы в ванне появились пузырьки. Теперь откройте программное обеспечение для сбора данных и нажмите «Пуск», чтобы убедиться, что записывается соответствующий сигнал пути.
Поверните спиральную ось ванны против часовой стрелки, чтобы расслабить кишечные трубки до их естественного состояния. Нажмите «Настройка», «Ноль всех входов», чтобы убедиться, что программное обеспечение устанавливает начальное напряжение кишечных зондов на ноль граммов. Затем поверните спиральную ось ванны по часовой стрелке, чтобы потянуть значение натяжения до одного грамма и стабилизировать его в 37 градусах Цельсия PSS на 30 минут.
Наблюдайте за ритмичными волнами спонтанного сокращения в программном обеспечении, так как это указывает на достаточную реакцию. Далее добавьте испытуемый препарат в ванну, чтобы изучить его влияние на функцию кишечного зонда. После этого остановите программное обеспечение для сбора данных и выполните анализ данных с помощью программного обеспечения.
Чтобы отредактировать табло данных и выбрать параметры анализа, нажмите на Окно, Планшет данных и выберите среднее напряжение для канала. Выберите кривую сокращения перед введением и нажмите «Добавить на планшет». Затем выберите кривую сокращения после введения и нажмите «Добавить на планшет».
Среднее значение натяжения до и после введения будет отображаться на планшете по очереди. Затем нажмите «Окно», «Планшет данных», чтобы скопировать данные в другое программное обеспечение для статистического анализа для дальнейшего анализа. Анализируйте другие параметры, такие как средняя амплитуда, средняя частота и интегральная площадь под кривой.
Замените среднее натяжение соответствующим параметром. После этого выберите кривую. Нажмите «Редактировать», «Копировать данные LabChart», чтобы скопировать данные в программу для рисования для визуализации.
В исследовании изучалось влияние различных агентов на натяжение изолированных колец кишечной трубки. Ацетилхолин значительно усиливал напряжение в этих трубках. И наоборот, атропин подавлял напряжение, вызванное ацетилхолином.
Точно так же хлорид бария также усиливал натяжение. С другой стороны, и адреналин, и нифедипин подавляли напряжение в изолированных кольцах кишечной трубки.
