Черепно-мозговая травма обычно связана с ухудшением памяти. Здесь мы представляем протокол для оценки пространственной рабочей памяти после черепно-мозговой травмы с помощью метрической задачи. К основным преимуществам метрических задач можно отнести возможность динамического наблюдения, недорогую воспроизводимость, относительную простоту реализации и низкую стрессовую среду.
Чтобы оценить оценку неврологической тяжести после травмы перкуссии парасагиттальной жидкости, поместите взрослую крысу Sprague Dawley в центр круга диаметром 50 сантиметров три раза и контролируйте ее способность выходить из круга. Чтобы проверить потерю рефлекса, поместите животное на спину на ладони и дайте оценку один, если крыса способна исправить себя. Чтобы проверить гемиплегию, оцените неспособность крысы противостоять принудительному позиционированию.
Чтобы проверить рефлекторный изгиб задней конечности, поднимите животное за хвост. Чтобы проверить способность ходить прямо, положите крысу на пол. Чтобы проверить ушной рефлекс, выполните легкую, тактильную стимуляцию, чтобы наблюдать втягивание уха.
Чтобы проверить рефлекс роговицы, слегка приложите мягкую палочку к глазу и измерьте реакцию моргания. Чтобы проверить рефлекс испуга, перетащите ручку через верхнюю часть проволочной клетки и запишите реакцию животного. Чтобы оценить потерю ищущего поведения в простирании, поместите крысу в новую среду и посмотрите, двигает ли крыса своими усами, нюхает или бежит.
Затем проверьте рефлексы конечностей для размещения на левой и правой передних конечностях, а затем на левой и правой задних конечностях. Чтобы проверить равновесие, выполните задачу балансировки луча, поместив крысу на луч шириной 1,5 сантиметра, в течение одного сеанса 20, 40 и более второго сеанса. Затем проведите тест на ходьбу луча с использованием трех балок разной ширины.
Перед выполнением метрической задачи поместите черную круглую платформу диаметром 200 сантиметров, толщиной в один сантиметр, на стол высотой 80 сантиметров и поместите два объекта в центр платформы, на 68 сантиметров друг от друга. Установите камеру с необходимым компьютерным программным обеспечением для захвата, сохранения и обработки данных, на высоте 290 сантиметров от пола. За день до анализа поместите крысу на платформу на 10 минут, чтобы приучать животное к новой среде.
В день выполнения задания поместите крысу на конец платформы, равноудаленный от объектов на 15-минутный период привыкания и начните запись. В конце экспериментального периода привыкания переведите крысу в индивидуальную клетку на пять минут и очистите платформу от пяти до десяти процентов спирта. Уменьшите расстояние между объектами до 34 сантиметров, затем поместите крысу на платформу на пять минут, записывая ее разведочную деятельность.
Снова очистите платформу, прежде чем приступить к следующему животному. Перед анализом видеофайлов вставьте программный аппаратный ключ, затем запустите программное обеспечение для отслеживания видео и откройте предустановленный шаблон. После проверки, дублирования и переименования настроек управления и обнаружения арены в основном поле зрения щелкните правой кнопкой мыши, чтобы выбрать захват фона.
В меню обзора выберите местоположение видеофайл, который будет использоваться в качестве фонового изображения. Захватите изображение и отметьте исследуемые области и зоны, чтобы откалибровать изображение для анализа. Выполните ту же настройку для параметров управления пробной версией и обнаружения.
После загрузки списка видеофайлов для анализа из пробного списка добавьте видео и укажите местоположение с необходимыми настройками. Затем выберите приобретение и начните пробную версию и экспортируйте все данные в электронную таблицу. Контрольная группа не показывает никаких неврологических дефицитов, через 48 часов после фиктивной травмы.
После ЧМТ неврологический дефицит значительно больше как у самцов, так и у самок травмированных животных. Во время метрической задачи время исследования объекта значительно короче для самцов крыс ЧМТ, чем для самцов крыс, управляемых фиктивным управлением. Такая же картина наблюдается для самок ЧМТ и самок крыс, управляемых фиктивной.
Следуя метрической задаче, мы можем выполнять другие методы оценки памяти, такие как лабиринт Барнса и задачи топологического и водного лабиринта. Метрическая задача также позволяет проводить дальнейшие исследования ухудшения памяти в сопоставимых моделях неврологических повреждений, таких как модели диффузной аксональной черепно-мозговой травмы и инсульта.
