Углубленная эхокардиографическая оценка структуры и функции правого желудочка является ценным инструментом для скрининга эффективности новых терапевтических мишеней на животных моделях легочной гипертензии. Основное преимущество этого протокола заключается в том, что он обеспечивает подробное описание всех эхокардиографических изображений и измерений, необходимых для оценки морфологии правого предсердия и правого желудочка, а также для характеристики систолической и диастолической функций правого желудочка. Этот метод описывает эхокардиографическую характеристику модели легочной гипертензии у крыс, индуцированной монокроталином.
Важно, чтобы эхокардиограф тратил достаточно времени на практику и становился опытным в визуализации правого желудочка, даже если у него был предыдущий опыт работы с левым желудочком. Начните с извлечения крыс из индукционной камеры после того, как они потеряют сознание, и перенесите их на платформу животной станции визуализации в положении дорсального пролежня. Вводите изофлуран с помощью носового конуса, соединенного с испарителем.
Нанесите электродный гель на каждую лапу и закрепите лапы в свинцовых пластинах электрокардиограммы платформы животного. Удалите мех, побрив грудь и используя средство для депиляции. Закрепите ректальный датчик температуры на месте.
Положите ватные рулоны на правую и левую сторону животного и закрепите их скотчем, чтобы сохранить положение при наклоне платформы. Чтобы получить изображения, наклоните платформу вправо на 10-15 градусов и опустите ее примерно на пять градусов. Переместите датчик так, чтобы он указывал на правую парастернальную линию крысы, и опустите датчик.
Поверните датчик против часовой стрелки, чтобы убедиться, что аорта и митральный клапан видны. Поместите линию объема образца в М-режиме в область, где правый желудочек наиболее широкий, и отрегулируйте ворота так, чтобы они охватывали правый и левый желудочки. Поднимите датчик и переместите его так, чтобы он был слегка наклонен к правой парастернальной линии крысы.
Переместите платформу в положение, слегка наклоненное вправо. Опустите датчик до тех пор, пока он не соприкоснется с гелем. Перемещайте платформу каудально вправо или влево, пока правый желудочковый отток не окажется в поле зрения, а легочный клапан не окажется в фокусе и не будет хорошо виден.
Затем нажмите Sign Store, чтобы записать изображение B-режима клапана легочной артерии. Сохраняя то же местоположение изображения в B-режиме, нажмите «Цвет», чтобы помочь идентифицировать поток через легочный клапан. Отрегулируйте скорость так, чтобы была видна точка наибольшей скорости.
Нажмите PW или импульсную волну, чтобы количественно оценить спектр кровотока. Совместите угол PW параллельно направлению потока через легочный клапан. Нажмите «Обновить», чтобы просмотреть скорость вращения легких.
Наклоните платформу в левый угол и вниз краниально как можно дальше. Поверните датчик против часовой стрелки на 30–45 градусов и переместите датчик так, чтобы он указывал на правое плечо или ухо животного. Опустите датчик до тех пор, пока он не соприкоснется с гелем.
Обеспечьте типичный четырехкамерный вид, где видны левый желудочек и левое предсердие, но тень грудины находится над свободной стенкой правого желудочка. Переместите датчик для регулировки применимого четырехкамерного обзора, получив сфокусированный вид правого желудочка. При необходимости слегка сдвиньте платформу каудально, пока не будет получена максимальная плоскость.
Убедитесь, что правый желудочек не ракурсирован и выходной тракт левого желудочка не открыт. Поместите курсор M-режима через трехстворчатое кольцо на стенке правого желудочка, чтобы визуализировать TAPSE, и нажмите «Обновить» и «Подписать хранилище», чтобы записать данные TAPSE. Нажмите B-режим, а затем нажмите «Цвет», чтобы помочь идентифицировать поток через телевизор. Нажмите PW, чтобы количественно оценить спектр кровотока.
Вернитесь в B-режим, прижмите ткань и поместите объемные ворота тканевого допплеровского образца в трехстворчатое кольцо у свободной стенки RV. Нажмите «Обновить», чтобы просмотреть изображение тканевого допплера. Используя PLAX-образы, была выполнена первичная оценка положения сердца и морфологии левого желудочка.
Оценка правого желудочка с использованием модифицированного вида PLAX показала, что крысы, получавшие монокроталин или MCT, имели увеличенный правый желудочек и смещенный левый желудочек по сравнению с контрольными крысами. Значительное увеличение RVIDd, RVIDs и RVFWT наблюдалось у крыс, получавших MCT, что указывает на расширение правого желудочка и утолщение свободной стенки правого желудочка. Модифицированный вид PLAX также использовался для визуализации легочной артерии и измерения диаметра легочного клапана.
Измерение скорости кровотока в легочной артерии с помощью допплерографии показало, что у контрольных крыс легочный поток имел симметричную V-образную форму с пиковой скоростью в средней систоле. В то время как у крыс, получавших MCT, пиковая скорость была медленнее и происходила раньше в систоле и демонстрировала выемку в поздней систоле. Апикальный четырехкамерный вид, ориентированный на правый желудочек, использовался для измерения правого желудочка и систолической области, а также области правого предсердия.
У крыс, получавших МСТ, наблюдалась дилатация правого предсердия из-за повышенного давления в легочной артерии. Кроме того, давление в правом желудочке было повышено, что привело к потере нормальной кривизны левого желудочка по сравнению с контрольной группой. Внутрижелудочковая перегородка также оказалась уплощенной.
Яркий апикальный четырехкамерный вид, сфокусированный на желудочках, также использовался для измерения TAPSE из опроса трикуспидального кольца в М-режиме. TAPSE был значительно снижен у крыс, получавших MCT, что свидетельствует о нарушении функции. Наиболее сложной частью этого протокола является получение оптимального апикального четырехкамерного вида, ориентированного на правый желудочек.
Мы предлагаем эхокардиографу следить за тем, чтобы весь правый желудочек был в поле зрения во время систолы и диастолы. Изображения, полученные с помощью апикального четырехкамерного вида, ориентированного на правый желудочек, могут быть позже использованы для анализа деформации, мощного инструмента, который может быть использован для оценки систолической дисфункции правого желудочка на начальных стадиях.
