Étalon interne

Source : Laboratoire du Dr B. Jill Venton - University of Virginia

L’objectif de nombreuses analyses chimiques est une analyse quantitative, où la quantité d’une substance dans un échantillon est déterminée. Afin de calculer avec précision la concentration d’un inconnu dans un échantillon, la préparation minutieuse est clé. Chaque fois qu’un échantillon est manipulé ou transféré, certains de l’échantillon peuvent être perdus. Il y a cependant, stratégies pour minimiser la perte de l’échantillon. Il y a aussi des stratégies pour faire face à la perte de l’échantillon et toujours en faisant des mesures précises de concentration.

Pour minimiser la perte de l’échantillon, l’idéal est de réduire au minimum le nombre d’étapes de manutention et de transfert échantillon. Par exemple, sa masse d’un échantillon solide directement dans une fiole qu’une solution se fera en réduit une étape de transfert. S’il est nécessaire de transférer d’un ballon à l’autre et une dilution est faite, puis triple rincer la verrerie permet de garantir que tout l’échantillon est transféré. Autres stratégies sont plus spécifiques à l’échantillon. Par exemple, les échantillons qui s’adsorber sur verre, comme les protéines, pourraient mieux être manipulés dans des tubes jetables en polypropylène. Les tubes ne sont pas hydrophiles, donc si une petite quantité d’échantillon doit être reversé dans l’eau, il est préférable d’avoir déjà ajouté l’eau dans le tube, donc l’échantillon peut être distribué directement dans le solvant. Il peut être préférable de se concentrer, plutôt que de les sécher complètement un échantillon, en raison de pertes d’insolubilities après réhydratation.

Une autre source de perte d’échantillon est par des manipulations échantillon incomplet. Par exemple, si une procédure de dérivation est utilisée et la dérivation est incomplète, alors la totalité de l’échantillon n'est pas observée. Les erreurs comme celle-ci sont des erreurs systématiques et peuvent être résolus en corrigeant le problème, comme la modification de la procédure de dérivation. Une autre cause de l’erreur systématique des mesures est des effets de matrice. Ceux-ci peuvent interférer avec la mesure de certaines substances et étalonnages performants dans la même matrice que l’échantillon peut réduire cet effet.

L’analyse quantitative est généralement effectuée à l’aide de normes soit externes ou internes. Pour des normes extérieures, une courbe d’étalonnage est faite en mesurant les différentes concentrations connues de l’analyte d’intérêt. Ensuite, l’échantillon est exécutée séparément de la norme. Pour les étalons internes, la norme est dans le même échantillon que l’analyte d’intérêt, ce qui permet la mesure à prendre en même temps. En règle générale, une espèce différente est ajoutée à l’appelé de l’étalon interne et le rapport de la réponse de l’étalon interne et l’analyte est calculé. L’idée est que le ratio de la réponse, appelé le facteur de réponse, est proportionnel à leur concentration. Alors que la méthode doit être en mesure de distinguer entre l’analyte d’intérêt et de l’étalon interne, les pertes d’échantillon qui se produisent après que l’étalon interne est ajouté devraient être similaires pour les deux substances et donc le ratio de la réponse reste la même. Un cas particulier de l’utilisation de normes internes est la méthode des ajouts dosés, où les quantités croissantes de l’analyte sont ajouté à la solution et le montant initial de l’analyte est calculée. Normes internes peuvent être utilisés en chromatographie, électrochimie et la spectroscopie.

1. manipulation des échantillons correct : Faire une Solution

1. Prenez un bécher propre et masse la quantité correcte de l’échantillon dedans. Enregistrer le réel masse utilisée. Dans cet exemple, une solution de l’adénine est faite dans une fiole jaugée pour utilisation comme étalon interne pour l’analyse suivante. La masse de l’adénine est de 100 mg. Faire pas directement la masse dans une fiole jaugée parce qu’il a un long cou et l’adénine ne peuvent pas être facilement ajoutée ou .......

Normes internes sont utilisés dans de nombreux domaines, y compris la spectroscopie et chromatographie. En spectroscopie, normes internes peuvent aider correct pour des erreurs aléatoires en raison de changements dans l’intensité de la source lumineuse. Si une lampe ou autre source lumineuse a une puissance variable, il affectera l’absorption et par conséquent, l’émission d’un échantillon. Toutefois, le ratio d’un étalon interne d’analyte reste constant, même si la source lumineuse n’est pas. Un exe.......