Summary
Abstract
Protocol
Discussion
Acknowledgements
Materials
References
Immunology and Infection
المسلكة الفأرية العدوى المعوية هو نموذج الحصانة TH2 حيث توليد فئران مقاومة للاستجابة وقائية TH2 والفئران عرضة توليد المرضية TH1 الاستجابة.
المسلكة الفأرية هو الممرض من الفئران الطبيعية والبيولوجية ومستضديا مشابهة نوعا من المسلكة التي تصيب البشر والحيوانات 1. تعطى البيض بالتزقيم المعدية عن طريق الفم ، يفقس في الأمعاء الصغيرة البعيدة ، غزو الخلايا الظهارية في الأمعاء (IECS) التي تبطن الخبايا من الأعور والقولون والداني على نضوج الديدان الإفراج البيض في البيئة 1. هذا النموذج هو أداة قوية لدراسة العوامل التي تحكم CD4 + T تنشيط الخلايا المساعد (ث) ، وكذلك تغييرات في ظهارة الأمعاء. وتتميز الاستجابة المناعية التي تحدث في سلالات مقاومة الفطرية ، مثل C57BL / 6 و BALB / ج ، من خلال الاستقطاب السيتوكينات TH2 (IL - 4 ، IL - 5 و IL - 13) وطرد الديدان بينما TH1 المرتبطة السيتوكينات (IL -12 ، IL - 18 ، IFN - γ) تعزيز الالتهابات المزمنة في عكر عرضة وراثيا / الفئران J 2-6. السيتوكينات TH2 تعزيز التغيرات الفسيولوجية في المكروية المعوية بما في ذلك سرعة دوران IECS ، القدح تمايز الخلايا ، والتوظيف ، والتغيرات في نفاذية الظهارية وسلس تقلص العضلات ، والتي تورطت في طرد الدودة 7-15. نحن هنا بالتفصيل بروتوكولا لنشر المسلكة الفأرية البيض والتي يمكن استخدامها في التجارب اللاحقة. ونحن نقدم أيضا عينة تجريبية الحصاد مع اقتراحات لمرحلة ما بعد الإصابة التحليل. عموما ، سوف توفر للباحثين هذا البروتوكول مع الأدوات الأساسية لتنفيذ ماوس الفأرية المسلكة نموذج العدوى التي يمكن استخدامها لمعالجة المسائل المتعلقة الميل ث في الجهاز الهضمي فضلا عن وظائف المناعة في IECS المستجيب.
1. نشر المسلكة البيض الفأرية
تفاصيل هذا البروتوكول معيار جرعة عالية العدوى الحادة الفأرية المسلكة التي يمكن تعديلها على النحو المطلوب من قبل المحقق. على سبيل المثال ، يمكن التضحية وأنسجة الفئران التي تحصد في أيام مختلفة. يمكن أن تقرر أن الفئران قد أنشأت بنجاح كامل عبء دودة يمكن التضحية أنه?.......
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الكندية لأبحاث الصحة (MSH - 95368 ، 89773 وMOP - MOP - 106623 لتشيكوسلوفاكيا) ، والمؤسسة الكندية للإبداع. SCM هو المستفيد من جمعية CIHR / الكندي للزمالة أمراض الجهاز الهضمي ما بعد الدكتوراه. CZ هو محقق CIHR جديد.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
اسم كاشف | شركة | فهرس العدد | تعليقات |
---|---|---|---|
إبر تغذية الحيوان (18 × 1 ½ ") | بوبر | 7912 | |
منحني سلس الملقط | Roboz | RS - 5047 | |
DMEM | Gibco | 11965 | |
NOD.Cg - Prkdc SCID Il2r gtm1Wjl / SzJ (NSG) | جاكسون مختبرات | 005557 | هذه هي الفئران التي استخدمناها ، ومع ذلك ، ينبغي لأي الفئران العوز المناعي أو سلالة معرضة العمل. |
RNAlater | Qiagen | 76104 | |
2 مل أنابيب | Axygen | MCT - 200 - C | |
15 مل أنابيب | صقر | 352096 | |
6 لوحات جيدة | صقر | 353046 | |
بارافورمالدهيد | الإلكترون المجهر العلوم | 15710 | |
α - RELMβ الأضداد | PeproTech المؤتمر الوطني العراقي | 0694270Rb |
Tags
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved