鞭虫感染muris：在肠道内的2型免疫和炎症模型

Published: May 24th, 2011

DOI:

10.3791/2774

Frann Antignano^1*, Sarah C. Mullaly^1*, Kyle Burrows¹, Colby Zaph^1,2

¹The Biomedical Research Centre, University of British Columbia, ²Department of Pathology and Laboratory Medicine, University of British Columbia

* These authors contributed equally

鞭muris感染肠道模型是一种Th2型免疫抗小鼠Th2反应产生保护和易感小鼠产生一种病态的Th1反应。

鞭muris是一个自然的小鼠的病原体和鞭虫物种感染人类和^牲畜 1的生物学和抗原性相似。感染性虫卵经口灌胃，在远端小肠孵化，侵入肠上皮细胞（IECS），该行盲肠和近端结肠隐窝和成熟后的蠕虫释放到环境中^的鸡蛋1。这个模型是一个功能强大的工具来检查因素控制的^CD4 +辅助性T细胞（TH）的激活，以及在肠上皮细胞的变化。免疫反应的抗近交系C57BL / 6和BALB / C，如发生的特点，是由Th2细胞极化的细胞因子（IL - 4，IL - 5和IL - 13）和驱逐的蠕虫病毒，而Th1相关的细胞因子（IL -12，IL - 18，IFN -γ）促进在遗传易感性的AKR / J ^小鼠 2-6的慢性感染。 Th2细胞因子，促进生理肠道微环境的变化，包括IECS的快速周转，杯状细胞的分化，招聘和上皮通透性和平滑肌收缩，所有这一切都^已经在蠕虫驱逐7-15牵连的变化。在这里，我们详细为传播鞭muris可以在随后的实验中使用的鸡蛋的的协议。我们还提供了为感染后的分析建议的样品实验收获。总体而言，该协议将提供的基本工具的研究人员，执行鞭muris小鼠感染模型，它可以用来解决有关的问题在胃肠道以及免疫效应功能的IECS钍倾向。

1。传播鞭muris蛋

要生成新的批次的鞭muris蛋，感染20-30免疫缺陷小鼠（如NOD.Cg Prkdc ^SCID IL2RG ^tm1Wjl / SZJ（NSG）或129S6/SvEvTac-Rag2 ^{tm1Fwa（RAG2 - / - ））}或遗传易感性小鼠（如AKR / J）6-8周约300鞭灌胃muris鸡蛋。
CO ₂窒息牺牲后32-35天的小鼠。
揭露鼠标的腹侧方和湿用70％乙醇的腹部。
使用镊子把握腹部皮肤，使一个小切口，?.......

该协议的细节了一个标准的高剂量急性鞭muris感染研究者的要求，可以修改。例如，老鼠可以牺牲和组织在不同的日子里收获。要确定小鼠已成功建立了完整的蠕虫负担，他们可以被牺牲的第14天，在这一点所有小鼠，应随身携带了约200蠕虫的负担。也可被感染小鼠的32天检测到任何蠕虫将达到成熟阶段，并会维持其生命期限的主机。此外，该协议可以适应慢性鞭虫muris感染模型。要?.......

这项工作是支持的加拿大卫生研究院（MSH - 95368，澳门币89773和MOP - 106623，以锆石）和加拿大创新基金会。 SCM是一个胃肠病学博士后CIHR /加拿大协会的收件人。锆石是一种新CIHR调查。

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试剂名称	公司	目录编号	评论
Name	Company	Catalog Number	Comments
动物饲养针（18 × 1 ½“）	波普尔	7912
光滑的弯钳	Roboz	RS - 5047
DMEM培养液	Gibco公司	11965
NOD.Cg Prkdc ^SCID IL2R ^gtm1Wjl / SZJ（NSG）	杰克逊实验室	005557	这些都是我们所用的老鼠，但是，任何免疫缺陷小鼠或敏感品系的工作。
RNAlater	Qiagen公司	76104
2毫升管	爱思进	MCT - 200 - C
15毫升管	鹘	352096
6孔板	鹘	353046
多聚甲醛	电子显微学	15710
α-RELMβ抗体	PeproTech公司	0694270Rb

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