Trichuris muris संक्रमण आंत में टाइप 2 प्रतिरक्षण और सूजन के एक मॉडल:

Published: May 24th, 2011

DOI:

10.3791/2774

Frann Antignano^1*, Sarah C. Mullaly^1*, Kyle Burrows¹, Colby Zaph^1,2

¹The Biomedical Research Centre, University of British Columbia, ²Department of Pathology and Laboratory Medicine, University of British Columbia

* These authors contributed equally

Trichuris muris संक्रमण Th2 उन्मुक्ति के एक पेट मॉडल जहां प्रतिरोधी चूहों एक सुरक्षात्मक Th2 प्रतिक्रिया पैदा करते हैं और अतिसंवेदनशील चूहों रोग TH1 प्रतिक्रिया उत्पन्न है.

Trichuris muris चूहों के एक प्राकृतिक रोगज़नक़ है और जैविक और antigenically Trichuris की प्रजातियों कि मनुष्यों और पशुओं ¹ को संक्रमित करने के लिए समान है . संक्रामक अंडे मौखिक gavage, बाहर का छोटी आंत में हैच द्वारा दिया जाता है, आंतों उपकला कोशिकाओं (IECs) पर आक्रमण है कि लाइन cecum और प्रॉक्सिमल बृहदान्त्र के तहखाने और परिपक्वता ^पर कीड़े 1 वातावरण में अंडे जारी. यह मॉडल कारकों की जांच करने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है कि नियंत्रण ^CD4 सेल + टी सहायक (गु) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से सक्रियण आंत्र उपकला में परिवर्तन. प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया है कि C57BL 6 / और / BALB ग के रूप में प्रतिरोधी जन्मजात उपभेदों में होता है, Th2 polarized (आईएल -4, आईएल -5 और आईएल -13) साइटोकिन्स और कीड़े के निष्कासन जबकि साइटोकिन्स TH1 जुड़े (आईएल द्वारा विशेषता है -12, आईएल -18, IFN-γ) आनुवंशिक रूप से अतिसंवेदनशील AKR / जम्मू ^2-6 चूहों में पुराने संक्रमण को बढ़ावा देने. Th2 साइटोकिन्स IECs के कारोबार तेजी से, जाम सेल भेदभाव, भर्ती और उपकला पारगम्यता और चिकनी मांसपेशी संकुचन, जो सभी के कीड़ा निष्कासन ^7-15 में शामिल किया गया है में परिवर्तन सहित आंतों microenvironment में शारीरिक परिवर्तन को बढ़ावा देने. यहाँ हम Trichuris muris अंडे जो बाद के प्रयोगों में इस्तेमाल किया जा सकता है प्रचार के लिए एक प्रोटोकॉल विस्तार. हम भी संक्रमण के बाद के विश्लेषण के लिए सुझावों के साथ एक नमूना प्रयोगात्मक फसल प्रदान करते हैं. कुल मिलाकर, इस प्रोटोकॉल बुनियादी उपकरण Trichuris muris माउस संक्रमण मॉडल जो जठरांत्र पथ के रूप में के रूप में अच्छी तरह से IECs की प्रतिरक्षा effector कार्यों में गु प्रवृत्ति से संबंधित सवालों का पता करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है प्रदर्शन के साथ शोधकर्ताओं प्रदान करेगा.

1. Trichuris muris अंडे प्रचार

Trichuris muris अंडे के नए बैच उत्पन्न करने के लिए, 20-30 immunodeficient चूहों को संक्रमित ^(eg. NOD.Cg ^Prkdc SCID Il2rg / tm1Wjl SzJ ^{(एनएसजी)} या ^{129S6/SvEvTac-Rag2 tm1Fwa (RAG2} - / -)) या आनुवंशिक रूप से अतिसंवेदनशील चूहों ( ?.......

इस प्रोटोकॉल एक मानक उच्च खुराक तीव्र Trichuris muris संक्रमण है जो अन्वेषक द्वारा अपेक्षित के रूप में संशोधित किया जा सकता है विवरण. उदाहरण के लिए, चूहों और बलिदान किया जा सकता है ऊतकों अलग अलग दिनों पर काटा. .......

इस काम के स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान कनाडा MSH (95,368, एमओपी 89,773 और CZ एमओपी - 106,623) और अभिनव के लिए कनाडा फाउंडेशन द्वारा समर्थित किया गया था. SCM गैस्ट्रोएंटरोलॉजी postdoctoral फैलोशिप के एक / CIHR कनाडा के एसोसिएशन के प्राप्तकर्ता है. CZ एक CIHR नई अन्वेषक है.

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अभिकर्मक के नाम	कंपनी	सूचीपत्र संख्या	टिप्पणियाँ
Name	Company	Catalog Number	Comments
पशु दूध पिलाने की सुई (18 x 1 "साढ़े)	पॉपर	7912
चिकना घुमावदार संदंश	Roboz	RS-+५०४७
DMEM	Gibco	11965
NOD.Cg Prkdc ^SCID Il2r ^gtm1Wjl / SzJ (एनएसजी)	जैक्सन प्रयोगशालाओं	005557	इन चूहों हम इस्तेमाल कर रहे हैं, लेकिन काम करना चाहिए, किसी भी immunodeficient चूहों या अतिसंवेदनशील तनाव.
RNAlater	Qiagen	76104
2 मिलीलीटर ट्यूबों	Axygen	MCT-200 - सी
15 मिलीलीटर ट्यूबों	बाज़	352096
6 अच्छी तरह प्लेटें	बाज़	353046
Paraformaldehyde	इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी विज्ञान	15710
α-RELMβ एंटीबॉडी	PeproTech इंक	0694270Rb

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